Biocompatibility and Histopathologic Change of the Acellular Xenogenic Pulmonary Valved Conduit Grafted in the Right Ventricular Outflow Tract

우심실 유출로에 이식한 무세포화 이종 폐동맥 판막도관의 생체 적합성 및 조직병리학적 변화양상에 대한 연구

  • 허재학 (상계백병원 흉부외과, 인제대학교 의과대학 흉부외과학교실) ;
  • 김용진 (서울대학교 의과대학 흉부외과학교실, 심장연구) ;
  • 박현정 (서울대학병원 전임상실험) ;
  • 김원곤 (서울대학교 의과대학 흉부외과학교실, 심장연구소)
  • Published : 2004.06.01

Abstract

Background: The xenogenic or allogenic valves after in Vitro repopulation with autologous cells or in vivo repo-pulation after acellularization treatment to remove the antigenicity could used as an alternative to synthetic polymer scaffold. In the present study, we evaluated the process of repopulation by recipient cell to the acellu-larized xenograft treated with NaCl-SDS solution and grafted in the right ventricular outflow tract. Material and Method: Porcine pulmonary valved conduit were treated with. NaCl-SDS solution to make the grafts acellularized and implanted in the right ventricular outflow tract of the goats under cardiopulmonary bypass. After evaluating the functions of pulmonary valves by echocardiography, goats were sacrificed at 1 week, 1 month, 3 months, 6 months, and 12 months after implantation, respectively. After retrieving the implanted valved conduits, histopathologic examination with Hematoxylin-Eosin, Masson' trichrome staining and immunohistochemical staining was performed. Result: Among the six goats, which had been implanted with acellularized pulmonary valved conduits, five survived the expected time period. Echocardiographic examinations for pulmonary valves revealed good function except mild regurgitation and stenosis. Microscopic analysis of the leaflets showed progressive cellular in-growth, composed of fibroblasts, myofibroblasts, and endothelial cells, into the acellularized leaflets over time. Severe inflammatory respon-se was detected in early phase, though it gradually decreased afterwards. The extracellular matrices were regenerated by repopulated cells on the recellularized portion of the acellularized leaflet. Conclusion: The acellularized xenogenic pulmonary valved conuits were repopulated with fibroblasts, myofibroblasts, and endothelial cells of the recipient and extracellullar matrices were regenerated by repopulted cells 12 months after the implantation. The functional integrity of pulmonary valves was well preserved. This study showed that the acellularized porcine xenogenic valved conduits could be used as an ideal valve prosthesis with long term durability.

배경: 이종 혹은 동종의 판막을 항원성이 높은 세포 성분을 무세포화 과정을 통해 제거한 후, 실험실에서 자가세포를 파종하거나 수용체 내에서 재세포화시킴으로써 합성 화합물 지지체의 대안으로 사용할 수 있다. 본 연구에서는 NaCl-SDS 용액을 이용하여 만든 이종 무세포화 폐동맥 판막도관을 우심실 유출로에 이식하여 수용체 세포로 재세포화되어 가는 과정을 평가하였다. 대상 및 방법: 돼지의 폐동맥 판막도관을 채취하여 NaCl-SDS 용액으로 처리하여 무세포화 이종 폐동맥 판막도관을 준비한 다음 이를 심폐바이패스하에 염소의 우심설 유출로에 이식하였다. 이식 후 1주, 1개월, 3개월, 6개월, 12개월이 경과한 후에 심초음파를 이용하여 폐동맥 판막의 기능을 평가하고, 폐동맥 판막 도관을 적출한 후 Hematoxylin-Eosin, Masson's trichrome 및 면역화학요법 염색을 시행하여 조직학적 변화양상을 관찰하였다. 결과: 무세포화 이종 폐동맥 판막도관을 이식한 6마리 가운데 5마리가 판막도관 이식 후 실험 종료시점까지 생존하였다. 이식 판막의 기능평가를 위한 심초음파에서 경도의 폐동맥 판막 폐쇄부전이나 협착 이외에는 판막의 기능이 잘 유지되고 있었다. 조직학적 검사에서 무세포화 판막도관내로 수용체 세포에 의한 재세포화가 시간경과에 따라 점진적으로 진행되는 양상을 보였으며 재세포화된 세포들은 섬유아세포, 근섬유아세포 및 혈관내피세포를 확인할 수 있었다. 문합부 주위에서 심한 염증반응을 보였으나 시간이 경과하면서 점차 감소하였다. 결론: 무세포화 이종 폐동맥 판막도관은 이식 12개월 후에는 수용체의 섬유아세포 및 혈관 내피세포로 재세포화되었고 세포간질도 잘 보존되어 있었으며, 폐동맥 판막의 기능도 잘 유지되었다. 따라서 본 연구를 통하여 무세포화 이종 판막도관은 장기적인 내구성을 갖춘 이상적인 판막 대치물로 사용될 수 있는 가능성을 시사하였다.또한 기관 및 식도에 대한 조직학적 검사에서 열손상에 의한 병변은 관찰되지않았다. 결론: 고주파에너지에 의한 절제술 시 심방의 전층에 병변을 만들기 위해서는 심장과 도자간의 접촉이 가장 중요한 인자로 생각된다. 본 연구에서 새로 개발한 기구는 고주파에너지를 이용한 도자절제술 시 심장과 도자 간의 확고한 접촉을 유도하여 심방 전층에 병변을 만드는 데 매우 효과적이었으며 이러한 기구의 사용은 향후 고주파에너지를 이용한 미로술식의 성적향상에 도움이 될 것으로 사료된다. 법 등, 급성신부전증의 발생을 예방하기 위하여 적극적인 노력을 기울이는 것이 좋을 것으로 사료된다.되어야 하리라 본다. 발전할 가능성을 보여 주었다.막형산화기의 산소교환에 유리한 반면, 회로압과 혈구세포 손상 측면에서 불리하다는 것을 알 수 있었다. 그러나 단일 박동형 구동펌프와 막형 산화기 사이에 압력완충장치를 설치하는 경우, 회로압 상승과 혈구세포손상을 유의하게 감소시킬 수 있었다.막하 이식법으로 생각되며, 조기에 유용한 암표지자 검사는 SCC-Ag 정량법이라고 판단된다.군인 폴리우레탄 인조 혈관 및 봉합편에 비해 일부 우수한 양상을 보였지만 본 실험의 범위내에서는 통계적 정량적 차이를 제시할 수는 없었다. 향후 보다 광범위한 동물 실험이 필요할 것으로 사료된다.된다.하고도 완전교정술 도달 확률이 높은 치료전략이라는 사실을 입증하였으며 주대동맥폐동맥혈관부행지의 크기나 숫자가 단일화하기 쉬운 형태학적 특징을 지닌 경우에는 조기에 일단계완전교정술을 시행하여 양호한 결과를 얻을 수 있다는 사실을 발견하였다. 반면 본 환아군 중 단일화술을 먼저 시도한 군에서는 비록 단계적인 단일화를 시도한 군에서 단일화술과 관계된 수술사망율이 약간 낮기는 하였으나 완전교정술까지 완료될 가능성에는 차이가 없었다. 그러나 이 경우 보다 정련된 적응 환자의 선택을 통한 단일화 우선전략의 시도와 장기 추적결과의 관찰이 요구된다.

Keywords

References

  1. J Thorac Cardiovasc Surg v.58 Biological factors affecting long-term results of valvular heterografts Carpentier,A.;Lemaigre,G.;Robert,L.
  2. J Thorac Cardiovasc Surg v.102 Biocompatibility of aldehyde-fixed bovine pericardium Grimm,M.;Eyble,E.;Grabenwoger,M.
  3. J Thorac Cardiovasc Surg v.119 Tissue-engineered valved conduits in the pulmonary circulation Stock,U.A.;Nagashima,M.;Khalil,P.N.(et al.) https://doi.org/10.1016/S0022-5223(00)70008-0
  4. Circulation v.102 no.SUP.Ⅲ Tissue engineering of pulmonary heart valves on allogenic acellular matrix conduitsin vivo restoration of valve tissue Steinhoff,G.;Stock,U.;Karim,N. https://doi.org/10.1161/01.CIR.102.8.e50
  5. Circulation v.106 no.SUP.I Construction of autologous human heart valves based on an acellular allograft matrix Cebotari,S.;Mertsching,H.;Kallenbach,K. https://doi.org/10.1161/01.CIR.0000019737.87850.5A
  6. Ann Thorac Surg v.70 Transpecies heart valve replacement: advanced studies of a bioengineered xeno-autograft Goldstein,S.;Clarke,D.R.;Walsh,S.P.(et al.) https://doi.org/10.1016/S0003-4975(00)01812-9
  7. Ann Thorac Surg v.75 In vivo repopulation of xenogenic and allogenic acellular valve matrix conduits in th pulmonary circulation Leyh,R.G.;Wilhelmi,M.;Rebe,P. https://doi.org/10.1016/S0003-4975(02)04845-2
  8. Int J Arting Organs v.25 no.8 Tissue-engineered heart valve leaflets: an effective method of obtaining acellularized valve xenografts Kim,W.G.;Park,J.K.;Lee,W.Y. https://doi.org/10.1177/039139880202500807
  9. Eur J Cardiothorac Surg v.14 Tissue engineering of heart valves-human endothelial cell seeding of detergent acellularized porcine valves Bader,A.;Schilling,T.;Teebken,O.E.(et al.) https://doi.org/10.1016/S1010-7940(98)00171-7
  10. Transplantation v.2 The acceptance and evolution of dermal homografts freed of viable cells Grillo,H.C.;McKhann,C.F. https://doi.org/10.1097/00007890-196401000-00006
  11. J Burn Care Rehab v.11 Observation on stability and contraction of composite skin grafts: xenodermis or allodermis with and isograft onlay Fang,C.H.;Robb,E.C.;Yu,G.S.(et al.) https://doi.org/10.1097/00004630-199011000-00009
  12. J Vasc Surg v.19 Cell-free arterial grafts: morphologic characteristics of aortic isograft, allografts and xenografts in rats Allaire,E.;Guettier,C.;Michel,J.B. https://doi.org/10.1016/S0741-5214(94)70071-0