Clinical and Experimental Reproductive Medicine

The Korean Society for Reproductive Medicine (대한생식의학회)
권호 표지

Isolation and Culture of Human Embryonic Stem-like Cells from Abnormal Blastocysts

비정상 포배기 배아에서 인간 배아줄기 유사 세포의 분리 및 배양에 관한 연구

  • Lim, Chun-Kyu (Laboratory of Reproductive Biology & Infertility, Samsung Cheil Hospital & Women's Healthcare Center, Sungkyunkwan University School of Medicine) ;
  • Sung, Ji-Hye (Laboratory of Reproductive Biology & Infertility, Samsung Cheil Hospital & Women's Healthcare Center, Sungkyunkwan University School of Medicine) ;
  • Park, Jong-Hyuk (Division of Stem Cell Biology, Medical Research Center, MizMedi Hospital) ;
  • Kim, Sun-Jong (Division of Stem Cell Biology, Medical Research Center, MizMedi Hospital) ;
  • Yoon, Hyun-Soo (Division of Stem Cell Biology, Medical Research Center, MizMedi Hospital) ;
  • Koong, Mi-Kyoung (Laboratory of Reproductive Biology & Infertility, Samsung Cheil Hospital & Women's Healthcare Center, Sungkyunkwan University School of Medicine) ;
  • Jun, Jin-Hyun (Laboratory of Reproductive Biology & Infertility, Samsung Cheil Hospital & Women's Healthcare Center, Sungkyunkwan University School of Medicine)
  • 임천규 (성균관 의과대학 삼성제일병원 생식생물학 및 불임연구실) ;
  • 성지혜 (성균관 의과대학 삼성제일병원 생식생물학 및 불임연구실) ;
  • 박종혁 (미즈메디병원 의과학연구소) ;
  • 김선종 (미즈메디병원 의과학연구소) ;
  • 윤현수 (미즈메디병원 의과학연구소) ;
  • 궁미경 (성균관 의과대학 삼성제일병원 생식생물학 및 불임연구실) ;
  • 전진현 (성균관 의과대학 삼성제일병원 생식생물학 및 불임연구실)
  • Published : 2003.12.30
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Abstract

목 적: 인간의 배아줄기세포는 전분화능과 영속성을 가지고 있어 발생 및 분화에 관련된 기초 연구 뿐 만 아니라 재생의학, 약물검색 등에서도 매우 유용한 재료로 이용될 수 있다.본 연구에서는 유전체의 변형이 배아줄기세포주의 확립 효율에 미치는 영향을 살펴보고자 비정상적인 포배기 배아에서 내세포괴를 분리하여 배양하였다. 연구 방법: 인간의 체외수정 및 배아이식술에서 공여 받은1개 또는3개의 전핵이 관찰되는 비정상 수정란 (n=20)과 착상전 유전진단에서 이수성이 확인된 배아 (n=27)를 대상으로 하였다. 일반적인 immunosurgery 방법으로 영양배엽세포들을 제거하고 내세포괴를 분리한 후 PMEF 혹은 STO feeder 세포위에서 배양하였다. 배아줄기세포의 배양시스템을 검증하기 위해서 이미 확립된 Miz-hES1 cell line을 동시에 같은 조건 하에서 계대배양하였다. 결 과: 비정상 수정란에서 발생된 포배기 배아에서 분리한 1개의 내세포괴가 배아줄기세포와 유사한 colony를 형성하였으나, 계대배양에는 실패하였다. 이수성 배아에서 발생된 포배기 배아의 내세포괴 배양에서는 두개의 colony가 계대배양 중에 영양배엽세포의 형태로 분화되어 미분화 상태를 유지하지 못하였다. 동일한 시기와 조건 하에서 계대배양된 Miz-hES1 cell line이 미분화상태로 유지됨을 karyotyping (46, XY)과 immunophenotyping (positive in SSEA-3 and -4)으로 확인하였다. 결 론: 본 연구의 결과에서 비정상 수정란과 이수성 배아에서 발생된 포배기 배아에서 유래한 내세포괴는 배아줄기세포주 확립 및 미분화 상태 유지 능력이 매우 저조한 것으로 여겨진다. 따라서, 인간의 배아줄기세포주를 확립하는데 있어 배아의 정상여부가 중요한 요소로 작용할 것으로 생각된다.

Keywords

References

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