초록
본 연구는 식중독 환자로부터 분리한 장염비브리오균 120 균주를 세균학적 특성시험, 항균제 감수성 여부, 독소 유전자와 독소조절유전자의 검출 및 보유 여부를 PCR, RPLA 로 시험하였으며, 각 지역간의 분리 세균을 GS-PCR, PFGE 시험으로 병원체 상관 관계를 분석한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 장염비브리오균은 0%의 NaCl 농도에서는 성장을 보이지 않았고, 8% NaCl이 첨가된 농도에서는 성장을 보였다. 국내 설사환자의 장염비브리오균의 O, K 혈청형은 17가지로 나타났으며, 이 중 O3:K6형이 68.3%로 가장 많았다. Ampicillin 등 18가지 항균제 시험에서 Ampicillin, Ticacillin에 높은 내성을 보였으며, Ampicillin, Ticacillin, Vancomycin에 동시 내성을 나타낸 경우가 52.5%로 나타났다. 독소조절 유전자 toxR은 PCR시험에서 시험균주 모두 368bp 크기의 유전자를 가지고 있었으며 장염 비브리오균의 조기진단에 유용한 것으로 확인되었고, 독소유전자 tdh는 120균주 중 109 균주만이 199bp 크기의 유전자를 보유하고 11균주가 음성이었다. trh 독소 유전자를 보유한 균주는 시험균주 중 3 균주만이 250bp 크기의 유전자를 보유하고 있었으며, tdh, trh 유전자를 동시에 가지고 있는 균주는 3균주로 이 균주의 TDH 독소 생성능은 x16 정도로 독소 생성능이 미약했다. 독소생성 Kanagawa 시험에서 120균주 중 107균주가 양성반응 을 나타내었으며, Kanagawa 양성반응을 보인 균주은 모두 tdh 유전자를 보유하고 있었다. Group Specific-PCR에서 최근에 유행을 일으키는 O3:K6 혈청형의 유연관계를 찾는데 유용한 것으로 나타났다. 조절유전자 toxRS 염기서열을 분석한 결과 같은 혈청형이라도 3균주는 7개의 염기서열 차이를 나타내었으며, 이는 현재 유행을 일으키는 균주와는 다른 균주임을 확인하였다. PFGE로 보다 더 세분화하여 혈청관계를 분류할 수 있었으며, 식중독 환자 유래 장염비브리오균은 3가지 type으로 나타났으며, 이들 균주 사이에는 상호 밀접한 상관관계를 나타내었다. 따라서 PFGE 기법으로 얻어진 결과는 분자 역학적으로 유용한 도구로 사용될 수 있음을 확인하였다.
The purpose of this study is to inquire into molecular epidemiological characteristics of Vibrio parahaemolyticus. For this study, 120 strains(120 strains of Vibrio parahaemolyticus sampled from diarrhea patients) were examined and analyzed for biochemical characteristics, TDH (thermostable direct hemolysin) antibiotics sensitivity and detection of toxR, gyrE, tdh, and tds gents. G-S PCR (Group Specific Polymerase), PFGE (Pulsed-field Gel Electrophoriesis) methods were performed on the materials from patients were results. 1 Vibrio parahaemolyticus didn't grow in 0% density of NaCl, but the fact was found that those grew in 8% density of NaCl. 2. O:K serotypes of Vibrio parahaemolyticus was turned up in domestic patients was 17 types. Among those O3:K6 was the most, it was 68.3%. 3. In 18 kinds of antibiotic tests resistant against Ampicillin, Ticacillin was comparatively high. the case of resistant against Ampicillin, Ticacillin, Vancomycin at the multiple resistant was 52.5%. 4. Toxin gene tdh had only 109 strains among 120 ones isolated from patients held the genes of 199bp size, and 11 strains was negativity 5. In the test of Kanagawa toxic productivity, 107 strains among strains isolated from patients appeared to be positivity reaction 6. The strain that held trh toxin was only 3, and those among test strains had the genes of 250bp size and that had tdh, trh genes at a time were 3 strains, and TDH toxic productivity of those were 16 times, and it was weak. 7. Group Specific-PCR appeared to be useful in the confirmation of O3:K6 serotype interrelations. 8. Three strains which showed difference of 7 DNA sequence even in the same serotype were detected by the result of analyzing the regular gene, toxRS DNA sequence. These strains are differ from general strains which carry infection easily. 9. These mutual dose epidemiological relations were classified into smaller-parts through PFGE method. As a result of such classify, 3 findings were found. V. parahaemolyticus sampled from diarrhea patients were classified into 3 types. And third, the result obtained through PFGE method can be used as a useful tool in a point of molecular-epidemiological view.