Abstract
This study was carried out to examine the effects of antioxidants and buthionine sulfoximide(BSO) on the development of porcine in vitro maturation(IVM) and in vitro fertilization(IVF) oocytes. Cumulus cell free embryos derived from porcine IVM/IVF oocytes were cultured NCSU23 medium with antioxidants or BSO under an atmosphere of 5% $CO_2$ and 5% $O_2$at 38.5$^{\circ}C$ for 5~6 days. The embryos cultured in medium with BSO showed a significanthy(P<0.05) lower rates(8.4~15.7%) of the development to the morulae and blastocyst stage than control group(35.9%). When the embryos were cultured with NAC, ebselen, glutathione and BSO, the proportions of embryos beyond morulae and blastocysts were significantly(P<0.05) higher in medium with NAC(40.5%), ebselen(44.2%) and glutathione(36.0%) than BSO(10.9%). In conclusions, these results indicate that NAC, ebselen and glutathione as a antioxidants can increase the proportion of embryos that develop beyond morulae stage. BSO, intracellular glutathione inhibitors, is suppressed the development of porcine embryos derived from IVM/IVF.
본 연구는 돼지의 미성숙 난포란을 체외에서 성숙, 수정시킨 후, 생산된 체외수정란을 NCSU 23 체외배양액에 항산화제NAC, ebselen 및 glutathione)와 BSO의 첨가가 돼지 체외수정란의 체외발육에 미치는 영향을 검토하였다. Glutathione 합성억제제인 BSO가 돼지수정란의 체외발육에 미치는 영향을 검토한 결과 0, 1.0 및 5.0 mM의 BSO을 첨가한 구에서 상실배기 이상 발육된 체외발육성적은 각각 35.9, 15.7 및 8.4%로서 BSO 첨가구가 대조구에 비해 통계적으로 유의하게 낮은 체외배율성적을 나타냈으며(P<0.05), NAC 1.0 mM ebselen 10 $\mu\textrm{m}$ 및 glutathione 100 $\mu\textrm{m}$ BSO 1.0 mM을 첨가하여 배양한 결과 상실배 이상 발육된 체외발육율은 40.5, 44.2, 36.0 및 10.9%로서 항산화제 첨가구가 BSO 첨가구보다 통계적으로 유의하게 높은 체외발육성적을 나타냈다P<0.05). 체외수정후 생산된 배반포기 수정란의 세포수는 BSO 농도(0, 1 및 5 mM)에 따른 차이는 인정되지 않았으나, 항산화제를 첨가한 경우에는 ebslene, NAC 및 glutathione 첨가구가 BSO 첨가구보다 유의하게 높은 세포수을 나타냈다(P<0.05).