Korean Journal of Medicinal Crop Science (한국약용작물학회지)
- Volume 9 Issue 2
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- Pages.156-165
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- 2001
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- 1225-9306(pISSN)
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- 2288-0186(eISSN)
Introduction and Expression of PAP gene using Agrobacterium in Scrophularia buergeriana Miquel
Agrobacterium을 이용한 PAP 유전자의 현삼으로 도입 및 형질발현
- Yu, Chang-Yeon (Division of Applied Plant Science, College of Agriculture & Life Sciences, Kangwon National University) ;
- Seong, Eun-Soo (Division of Applied Plant Science, College of Agriculture & Life Sciences, Kangwon National University) ;
- Lim, Jung-Dae (Division of Applied Plant Science, College of Agriculture & Life Sciences, Kangwon National University) ;
- Huang, Shan-Ai (Division of Applied Plant Science, College of Agriculture & Life Sciences, Kangwon National University) ;
- Chae, Young-Am (College of Agriculture & Life Science Seoul National University)
- 유창연 (강원대학교 농업생명과학대학 식물응용과학부) ;
- 성은수 (강원대학교 농업생명과학대학 식물응용과학부) ;
- 임정대 (강원대학교 농업생명과학대학 식물응용과학부) ;
- 황선애 (강원대학교 농업생명과학대학 식물응용과학부) ;
- 채영암 (서울대학교 식물생산과학부)
- Published : 2001.06.30
Abstract
Exogeneous application of pokeweed antiviral protein (PAP), a ribosomal-inacivating protein in the cell wall of Phytolacca americana (pokeweed) protects heterologous plants from viral and fungal infection. A cDNA clone of PAP introduced into Scrophularia buergeriana Miquel by thransformation with Agrobacterium tumefaciences. For plant transformation, explants were precultured on shoot induction medium without kanamycin for 2-5 day, and then they were cocultured with Agrobacterium for 10 minutes. The explants were placed on co culture medium in dark condition,
현삼의 기내배양에서 낮은 농도의 2,4-D(0.01, 0.1mg/l) 와 TDZ(0.01, 0.1, 2.0mg/l)이 조합처리시 shoot 분화가 좋았으나, 2,4-D의 농도가 높아질수록 TDZ과 조합처리시 shoot 분화가 저조 하였다. 형질전환 확인을 위한 PCR 분석에서 선발표지 유전자로 사용되는 NPT II gene의 확인하였는데 형질전환되지 않은 식물체에서는 나타나지 않는 DNA 절편이 형질전환 식물체에서 나타났으며 kanamycin 50 mg/ l 첨가된 배지에서 선발된 식물체에서 NPT II gene(700bp)이 plant genome 안으로 삽입되었음을 확인하였다. 형질전환 식물체의 항균활성 검정에서는 Asperigillus awamori에 대해 대조구 식물체와 같이 항균성이 없는 것으로 나타났으나 항바이러스성 단백질인 PAP가 도입된 식물체에서는
Keywords
- Scrophularia buergeriana Miquel;
- pokeweed antiviral protein (PAP);
- ribosomal-inacivating protein (RIP)