Abstract
The concentration of free fatty acids and fatty acid composition as well as cholesterol supersaturation in bile may be an important factor in the gallstone formation. Therefore, we simultaneously determinded 23 fatty acids in bile by selected ion monitoring (SIM) method of gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Biliary fatty acids were extracted by aminopropyl column and the extracts with (phospholipid fraction) or without (free fatty acid fraction) alkaline hydrolysis of phospholipid were derivatized with MSTFA/TMCS (N-methyl-N-trimethylsilyl-trifluoroacetamide/trimethylsilylchloride) mixture in order to be detected on the GC-MS. The recovery range of this method was 61.1-99.0% and the RSD value of within-a-day and day-to-day test were 3.1-25.6% and 3.8-27.0%, respectively. Using this method, biliary profile was investigated in the bile of normal controls and patients with gallstones. The amounts and their distribution of free and phospholipid fatty acids showed different pattern between normal subjects and patients.
담즙내 지방산의 농도와 그 조성이 콜레스테롤의 과포화와 마찬가지로 담석 형성 과정에 관련이 있는 것으로 여겨지고 있다. 본 연구에서는 gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)의 selected ion monitoring (SIM) 방법을 이용하여 담즙내 23종의 지방산 동시 분석을 시도하였다. 전처리 과정의 첫 단계로 유리 지방산과 인지질 지방산을 분리하기 위해 aminopropyl column을 사용하였고 GC-MS에서의 검출을 위하여 유리 지방산은 MSTFA/TMCS 혼합액으로 유도제화를 실시하였으며 인지질 지방산의 경우는 염기를 이용한 가수분해를 실시한 뒤 위와 동일한 과정으로 유도제화하였다. 이 때의 회수율은 61.1-99.0% 이었으며 각각 3.1-25.6%와 3.8-27.0%의 within-a-day와 day-to-day 분석의 RSD 값을 얻었다. 이 방법을 적용하여 정상인과 담석증 환자의 담즙내에 존재하는 유리 및 인지질 지방산의 농도를 알아보았으며 이 때 각 물질들의 농도와 분포가 두 군간에 차이를 나타냄을 알 수 있었다.
