Effect of Inhibitions of Ginkgo biloba Extracts on Induction of Reactive Oxygen Species and Release of Inflammation Mediator Arachidonic Acid from U937

U937을 이용한 활성산소 유도와 염증관련 아라키돈산 유리에 있어 은행잎 엑스의 억제 효과

Effect of inhibitions of three kinds of Ginkgo biloba extracts(Ginkgo biloba extract, Ginkgolide A, and Ginkgolide B) on induction of reactive oxygen species and release of inflammation mediator arachidonic acid were tested. Three kinds of Ginkgo biloba extracts could not inhibit the pyrogallol auto-oxidation, but they showed the hydrogen atom donating activity in DPPH assay. When 10 ${\mu}M$ hydrogen peroxide and 400 ${\mu}g/mL$ of three kinds of Ginkgo biloba extracts were added to U937 monocytic macrophage, the induction of lipid peroxidation was not observed. The Ginkgo biloba extract showed the most powerful inhibition among the extracts. And only Ginkgolide A was good for the inhibition of the protein degradation. The release of inflammation mediator arachidonic acid was induced by adding TPA and calcimycin to U937. In this assay, even 10 ${\mu}g/mL$ of three different Ginkgo biloba extracts excellently blocked the release of arachidonic acid. Particularly, the inhibition efficiency of Ginkgolide B was about 11 times higher than that of induction, and was about 4 times higher than that of the control of noninduction. This result suggests that the release of arachidonic acid is not inhibited by the antioxidant activity of Ginkgo biloba extracts, but a pre-step of the release of arachidoinc acid is inhibited by Ginkgo biloba extracts.

은행잎 엑스 3종류를 이용하여 활성산소와 염중관련 아라키돈산 유리의 억제능을 보았다. 은행잎 엑스, Ginkgolide A, Ginkgolide B의 3종류 모두 pyrogallol 자동산화에서는 항산화능을 발휘하지 못하였으나, DPPH법의 전자공여능에서는 환원력을 나타내었다. 10 ${\mu}M$ 과산화수소($IC_{50}=10\;{\mu}M$)로 U937의 지질과산화 유도 시 은행잎 엑스 3종류 모두 400 ${\mu}g/mL$이상에서는 보호하였으나, 은행잎 엑스가 가장 좋았다. 단백질 분해실험에서는 Ginkgolide A만이 효과가 좋아 50 ${\mu}g/mL$에서도 거의 억제하였다. TPA와 calcimycin을 U937에 첨가하여 염중 유도의 중요 물질인 아라키돈산 유리를 유도하였다. 이 아라키돈산 유리 유도 시 은행잎 엑스 3종류 모두 10 ${\mu}g/mL$에서도 뛰어난 억제능을 보였으며, 특히 Ginkgolide B는 유도 시에 비하여 11배 억제하였으며, 비유도시인 대조군보다도 약 4배의 억제능을 보였다. 따라서 은행잎 엑스가 항산화능에 의해 아라키돈산 유리를 억제하는 것이 아니라 아라키돈산 유리의 전 단계의 어느 부분을 강하게 억제하여 아라키돈산 유리가 저해되는 것으로 생각된다.