Analysis of the Metabolites of 1,2,4-Trimethylbenzene by Capillary Electrophoresis

모세관 전기영동법을 이용한 1,2,4-트리메틸벤젠 대사체의 분석

The metabolites of 1,2,4-trimethylbenzene (TMB) were synthesized and determined by capillary electrophoresis (CE). The optimum conditions of CE for the separation and determination of 3,4-, 2,4-, 2,5-dimethylbenzoic acid and 3,4-, 2,4-, 2,5-dimethylhippuric acid from the rat urine were as following: the fused silica capillary($75{\mu}m$ i.d. ${\times}$ 36 cm length, 29 cm to detector) was used and kept at $15^{\circ}C$. The applied voltage was 10㎸ and compounds were detected at UV 210 mnm and 254 nm. The running electrolyte was 0.1 M phosphate buffer (pH 7) containing 15 mM of ${\beta}-CD$ and 3% of 2-propanol. The relative amount of the metabolite of 1,2,4-TMB in the rat urine was 56.7% of 3,4-isomer, 30.5% of 2,4-isomer and 12.8% of 2,5-isomer. This method can be applied to the analysis of TMB-metabolites in human urine.

방향족 탄화수소인 trimethylbenzene (TMB)은 그 사용량이 늘어갈 뿐 아니라 직업적으로 폭로되는 양도 증가하고 있으므로 생물학적 모니터링 및 흡수, 대사, 배설에 관한 연구가 중요시되고 있다. 일반적으로 TMB는 간의 산화효소에 의해 하나의 메틸기가 산화되고 이것이 glycine과 포합되어 배설되는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 1,2,4-TMB의 대사체를 합성하고, 모세관 전기영동법으로 분석할 수 있는 방법을 개발하였다. 모세관 전기영동법으로 흰쥐의 뇨 중에서 1,2,4-TMB의 대사체인 3,4-, 2,4-, 2,5-dimethylbenzoic acid 및 3,4-, 2,4-, 2,5-dimethylhippuric acid를 분석하기 위하여 내경 $75{\mu}m$, 총길이 36cm (검출기까지 29cm)인 용융실리카 모세관을 $15^{\circ}C$로 유지하면서 양단에 10㎸의 전압을 걸어주고, 전해질로는 15mM ${\beta}-CD$, 3% 2-프로판올을 포함하는 0.1M 인산완충액 (pH 7)을 사용하였으며, 검출신호는 UV 210nm와 254nm에서 동시에 모니터링하였다. 뇨 시료의 분석 결과 배설된 1,2,4-TMB의 대사체의 상대량은 3,4-이성질체가 56.7%, 2,4-이성질체가 30.5%, 2,5-이성질체가 12.8%였다. 이 방법은 노동자의 뇨 분석에도 적용될 수 있을 것으로 생각된다.