Korean Journal of Animal Reproduction (한국가축번식학회지)

The Korean Society of Animal Reproduction (한국동물번식학회)
권호 표지

Effect of the Combination of Co-Culture System and Supplemented Protein Sources on the In Vitro Development of Bovine IVF Embryos

각종 공동배양 배지와 첨가 단백질원의 조합이 소 체외수정란의 체외배양에 미치는 영향

  • Cheong, H.T. (College of Animal Resource Science, Kangwon National University) ;
  • Lee, J.H. (College of Animal Resource Science, Kangwon National University) ;
  • Park, C.K. (College of Animal Resource Science, Kangwon National University) ;
  • Yang, B.K. (College of Animal Resource Science, Kangwon National University) ;
  • Kim, C.I. (College of Animal Resource Science, Kangwon National University)
  • 정희태 (강원대학교 동물자원과학대학) ;
  • 이준희 (강원대학교 동물자원과학대학) ;
  • 박춘근 (강원대학교 동물자원과학대학) ;
  • 양부근 (강원대학교 동물자원과학대학) ;
  • 김정익 (강원대학교 동물자원과학대학)
  • Published : 1999.12.01
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Abstract

The present study was conducted to investigate the effects of various co-culture systems and supplemented protein sources on the in vitro development of bovine IVF embryos. Bovine cumulus oocyte complexes (COCs) were matured and fertilized in vitro. Presumptive zygotes with cumulus cells were transferred to TCM-199 or CRlaa containing 10% FBS or 3mg/$m\ell$ BSA, and cultured for 36~40 hr. After primary culture, cleaved embryos were co-cultured with cumulus cells(CC), bovine oviduct epithelial cells(BOEC) or Buffalo rat liver cells (BRLC) in TCM-199 or CRlaa supplemented with FBS or BSA respectively, for further 6 days. Cleavage rate increased with BSA(P＜0.01) in the both TCM-199(79%) or CRlaa(74%) When embryos were co-cultured with CC or BOEC in TCM-199, blastocyst development was enhanced with BSA(40% and 43%) compared to FBS (22% and 29%) , whereas in CRlaa no difference observed between BSA(40% and 39%) and FBS (40% and 42%). When embryos were co-cultured with BRLC monolayer, FBS enhanced the blastocyst development (P＜0.05) compared to BSA in both TCM-199(41% vs 31%) and CRlaa (44% vs 37%). The result of the present study showed that the cleavage rate of bovine IVF embryos increased with BSA, The result also showed that BSA can enhance the development of IVF embryos in co-culture with CC or BOEC in TCM-199, suggesting the in vitro development is affected by the medium and supplemented protein sources in co-culture with somatic cells.

본 연구는 소 체외수정란의 체외배양 시 공동배양배지 및 첨가되는 단백질원에 따른 소 체외수정란의 체외발육능을 검토하였다. 소의 미성숙 난포란을 체외에서 성숙, 수정시킨 후, BSA 또는 FBS를 첨가한 TCM-199 또는 CR1aa 배양액으로 단순배양 또는 난구세포, 소 난관상피세포 (BOEC) 및 Buffalo rat 간세포 (BRLC)와의 공동배양 후, 체외수정란의 분할율 및 발육능을 검사하였다. 소 성숙 난포란을 체외수정 후, 분할율은 배양액의 종류에 관계없이 BSA를 첨가한 경우에 유의적으로 높았다 (P＜0.01). 분할된 수정란을 BSA 또는 FBS가 첨가된 TCM-l99 또는 CRlaa 배양액 내에서 단순배양한 결과, 배반포 발육율은 단백질원에 관계없이 CR1aa 액에서 배양한 경우가 유의적으로 높았다 (P＜0.05). 분할된 수정란을 난구세포 또는 BOEC와 공동배양 시, TCM-l99 배양액에서는 FBS에 비하여 BSA 첨가구가 높은 배반포 형성율을 보였으나 (P＜0.05), CRlaa 배양액에서는 BSA와 FBS 첨가구 모두 높은 발육율이 얻어졌다. 한편, 분할된 수정란을 BRLC의 단층세포와 공동배양 시에는 배양액의 종류와 관계없이 BSA에 비하여 FBS가 수정란의 발육율을 향상시켰다 (P＜0.05). 본 실혐의 결과는 배양액 중에 BSA 첨가가 소 체외수정란의 분할을 촉진할 수 있으며, 체외수정란을 체세포와 공동배양 시, 수정란의 발육율이 배양액 및 첨가 단백질원의 종류에 따라 영향을 받아, TCM-199 액에서 난구세포 또는 BOEC와 공동 배양하는 경우에는 BSA 첨가가 효과적일 수 있음을 수 있음을 보여준다.

Keywords