초임계 유체 크로마토그래피(SFC) 방법에 의한 Paclitaxel 및 그 유도체의 분리 정제

Purification of Paclitaxel and Its Derivatives by Supercritical Fluid Chromatography(SFC)

  • 조병관 (아주대학교 공과대학 화학·생물공학부) ;
  • 변상요 (아주대학교 공과대학 화학·생물공학부)
  • 발행 : 1999.02.01

초록

초임계 이산화탄소 크로마토그래피 방법에 의한 paclutaxel baccatm III, 7-epn-10-deacetyltaxol.cephalomanme, 10-deacetyltaxol의 분리에서 초임계 유체의 압력, 온도 및 이동상의 조성이 미치는 영향을 연구하였다. Pachaxel, 10-deacetylbaccatin III, 10-deacetyltaxol은 압력, 온도, 이동상의 조성 변화에 의하여 우수한 분리 결과를 얻을 수 있었다. Pacltaxel 의 경우 압력 275kg/$\textrm{cm}^2$,온도 $40^{\circ}C$, 이동상 조성을 초기 20분간 초임계 이산화탄소와 보조용매인 메탄올을 각각 3.9~3.6mL/min, 0.1~0.4mL/min의 gradienl조건으로 하였을 때 가장 우수한 분리능을 보였다. Baccatin III, caphalomamine, 7-epn-10-deacetyltaxol의 경우에는 낮은 분리능을 보였다. 주목 분말 시료로부터 paclitaxel 을 정제할 때 on-linc coupled SFE/SFC장치를 이용하여 추출 정제 공정을 단순화하였다. 초임계이산화탄소를 용매로하여 추출, 1차 정제 및 크로마토그래픽 정제 단계를 연속적으로 거쳐 38%수율로 95%paclitazel을 얻을 수 있었다.

Studies were carried out to elucidate the effects of pressure, temperature and mobile phase composition on supercritical $CO_2$ chromatographic separations of paclitaxel, baccatin III, 10-deacetyl baccatin III, 7-epi-10-deacetyltaxol, cephalomanine, and 10-deacetyltaxol. High resolutions of paclitaxel, 10-deacetylbaccatin III, 10-deacetyltaxol were observed with optimized pressure, temperature, and mobile phase composition. The highest resolution between paclitaxel and 10-deacetylbaccain III was observed at 275 kg/$\textrm{cm}^2$, $40^{\circ}C$ with the mobile phase composition of gradient mixture of 3.9-3.6 mL/min $CO_2$, 0.1-0.4 mL/min methanol for 20 min. Resolutions of baccatin III, capalomannine, and 7-epi-10-deacetyltaxol were found to be low in this study. On-line coupled SFE/SFC process was applied to isolate paclitaxel from yew tree powder. As a consequence, paclitaxel with a purity of 95% was obtained with a recovery yield of 38%.

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참고문헌

  1. Frac-tionation by packed- column SFC and SFE Saito, M.;Y. Yamauchi;T. Okuyama
  2. Anal. Chem. v.53 Capillary Supercritical Fluid Chro-matography Novotny, M.;S.R. Springton;P.A. Peaden;J.C. Fjeldsted;M.L. Lee
  3. J. Liq. Chro-matogr. v.5 Supercritical Fluid Chromatography: methods and principles Peaden, P.A.;M.L. Lee
  4. J. Chromatogr. v.295 Supercritical Fluid Chromatography with Fused- Silica Packed Columns Hirata, Y.;F. Nakata
  5. J. Chromatogr. v.295 Supercritical Fluid Chromatography with Micro Packed Columns and Carbon Dioxide as a Mobile Phase Takeuchi, T.;D. Ishii;M. Saito;K.Hibi
  6. Anal. Chem. v.56 Determination of Hydrocarbon Types in Petroleum Liquids by Super-critical Fluid Chromatography with Flame Ionization Detection Noriss, T. A.;M.G. Rawdon
  7. Anal. Chem. v.54 Capillary Column Supercritical Fluid Chromato-graphy / Mass Spectrometry Smith, R. D.;W.D. Felix;J.C. Fjeldsted;M.L. Lee
  8. Anal. Chem. v.57 Supercritical Fluid Chromatography of Polar Drugs Using Small-Particle Packed Columns woth Mass Spectrometric Detection Crowhter, J.B.;J.D. Henion
  9. Anal. Chem. v.58 Supercitical Fluid Chromatography / Fourier Transform Infrared Spectrometry with an Automatic Diffuse Reflec-tance Interface Shafer, K.H.;S.L. Pentoney, Jr.;P.R. Griffiths
  10. Anal. Chem. v.54 Super-critical Fluid Chromatography with Small Particle Diameter Packed Columns Gere, D.R.;R. Board;M.McManigill
  11. J. Am. Chem. Soc. v.93 Plant Antitumor Agent. The Isolation and Structure of Tzxol, a Novel Antileukemic and Anti-tumor Agent from Taxus brevifolia Wani, M.C.;H,L, Taylor;M.E. Wall;P. Coggon;A. T. Mcphail
  12. Nature v.368 Taxol Inhibits Progression Congenitial Polycystic Kidney Disease Woo, D.D.L.;S.Y.P. Miao;J.C. Palayo;A.S. Wolf
  13. J. Nat. Prod. v.47 Mise en evidence de nouveaux analogues du taxol extraits de Taxus baccata Senilh, V.;S. Blechert;M. Colin;D. Guenard;F. Picot;P. Potier;P. Varenna
  14. J. Forestry v.91 Taxol, A Study in Technology Commercialization Wheeler, N.C.;M.T. Hehnen
  15. J. Chem. Soc. Taxine. Part I. Isolation Studies and the Functional Groups of O-Cinnamoyltaxine- I Baxter, J.N.;B. Lythogoe;B. Scales;R.M. Scrowston;S. Tripett
  16. 한국생물공학회지 v.11 초임계 유체를 이용한 주목 수피로부터 taxol의 추출에 관한 연구 서정혁;조병관;변상요;김공환
  17. 석사학위논문 초임계 이산화탄소를 이용한 주목의 잎과 종자로부터 탁솔관련 물질 추출에 관한 연구 전문균
  18. 석사학위논문 보조 용매가 첨가된 초임계 이산화탄소를 이용한 탁솔과 바카틴 Ⅲ의 추출에 관한 연구 신혜원