Introduction of Thermotolerant Gene into Rice Plant by Agrobacterium Mediated Transformation

Agrobacterium을 이용한 내열성 유전자의 벼로의 형질전환 및 발현

To investigate the function of chloroplast-localized small HSP in rice, the cDNA, Oshsp21, was introduced into rice plants via Agrobacterium-mediated gene transfer system. Calli induced from rice immature embryos were co-cultivated with a A. tumafaciens EHA101 that contained a plasmid, pIHSP21. The efficiency of plant regeneration from the calli co-cultivated with the Agrobacterium was about 30%. PCR and Southern blot analyses using genomic DNA revealed that gene for the chloroplast small HSP was introduced into the genome of rice. Expression of transgene was investigated by northern blot analysis. Results indicate that the transgene, Oshsp21, was constitutively expressed at normal growth temperature.

벼에 있어서 엽록체 small heat shock protein(small HSP)의 기능을 밝히기 위하여 Agrobacterium을 이용한 형질전환법을 이용하여 벼로부터 분리한 small HSP cDNA를 도입하였다. Agrobacterium의 감염에는 벼의 미성숙 배로부터 유도한 callus를 이용하였다. 형질전환 후의 재분화율은 약 30%였다. 형질전환을 통하여 얻어진 식물체의 genomic DNA로부터 PCR 분석과 Southern blot 분석으로 엽록체 small HSP 유전자의 도입을 확인하였다. 도입 유전자의 형질전환 벼에 있어서 유전자의 발현 양상을 northern blot 분석으로 조사하였다. 그 결과 도입된 유전자는 상온에서의 발현량이 서로 다르게 나타났으며 항상적으로 발현하고 있음을 확인하였다.