Abstract
To verify enchancing effect of polycation of polycation on the retroviral infecivity, we directly measured the binding affinity of retroviruses to the target cells in the presence or in the absence of polybrene with R18 fluorescence assay and examined the effect of the polymers on the relationship between the host cell and the retroviral infecity. There was no difference in the effect of the types of charge of the polymer on the binding affinity. However, polycations, in general, show effect on the retrovirus infecity. This results suggest that the enhancing effect of polybrene and other polycations on the infecity is not due to the binding step but due to the post-binding steps, especially the internalization step. With the result of the internalization of FITC-labeled poly-L-lysine into the host cells, it is suggested that the uptake of polycations into the host cells would play a crucial role in the intermalization of retroviruses.
유전자 전달 수단으로 사용되는 레트로바이러스의 감염 효율을 증대시키는 고분자양이온의 역할을 알아보기 위해 R18 형광 물질을 이용해 고분자 양이온 중 하나인 polybrene의 유무에 따른 레트로바이러스와 세포간의 binding affinity를 직접적으로 측정하였으며 그 외의 여러 고분자물질의 레트로바이러스의 감염에 어떠한 영향을 미치는지 알아보았다. 그 결과 고분자의 전하는 레트로바이러스와 세포간의 binding affinity에는 영향을 미치지 않았으나 감염효율을 증대시키는 것은 고분자양이온 뿐이었다. 이는 고분자양이온이 레트로바이러스의 감염시 binding과정이 아닌 그 이후의 과정, 특히 internalization 과정에 영향을 미치는 것으를 나타난다. FITC가 부착된 poly-L-lysine이 세포안으로 들어가는 사실을 통해 고분자양이온의 세포안으로의 유입이 바이러스의 internalization과정에 중대한 영향을 미치는 것을 알 수 있었다. 또한 분자량이 다른 poly-L-lysine을 이용해 고분자양이온의 경우 그 분자량에 따라 최적농도가 다름을 알 수 있었다.