Construction of shuttle vectors expressing the cry11Aa gene and their mosquitocidal activity

모기살충성 cry11Aa 유전자를 발현하는 벡터의 구축과 모기살충효과

  • Lee, Dae-Weon (Division of Applied Biology and Chemistry, College of Agriculture and Life Sciences, Seoul National University) ;
  • Kim, Ho-San (Division of Applied Biology and Chemistry, College of Agriculture and Life Sciences, Seoul National University) ;
  • Je, Yeon-Ho (Division of Applied Biology and Chemistry, College of Agriculture and Life Sciences, Seoul National University) ;
  • Kim, Joo-Up (Department of Agronomy, College of Agriculture, Chungbuk National University) ;
  • Yu, Hyo-Sok (Division of Applied Biology and Chemistry, College of Agriculture and Life Sciences, Seoul National University) ;
  • Kang, Seok-Kwon (Division of Applied Biology and Chemistry, College of Agriculture and Life Sciences, Seoul National University)
  • 이대원 (서울대학교 응용생물화학부) ;
  • 김호산 (서울대학교 응용생물화학부) ;
  • 제연호 (서울대학교 응용생물화학부) ;
  • 김주읍 (충북대학교 농학과) ;
  • 유효석 (서울대학교 응용생물화학부) ;
  • 강석권 (서울대학교 응용생물화학부)
  • Published : 1998.04.30

Abstract

For the expression of the cry11Aa gene highly toxic to dipteran insects, we constructed two cyanobacteria-Escherichia coli(E. coli) shuttle vectors, pCYASK5-l and pCYASK5-2. These vectors were transformed into E. coli and selected with kanamycin. The expression of the cry11Aa gene in E. coli was characterized by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and Western blot analysis. Two E. coli transformants harboring pCYASK5-1 and pCYASK5-2 expressed the cry11Aa gene in size of 72 kDa and 64 kDa, respectively and showed over 89% mortality against Culex pipiens larvae.

모기에 독성을 보이는 cry11Aa 유전자를 발현시키기 위해 cyanobacteria와 E. coli에서 발현 될 수 있는 두 가지 상이한 벡터 (pCYASK5-1, pCYASK5-2)를 제작하였다. 구축한 두 벡터를 E. coli에 형질전환하여 cry11Aa 유전자의 발현을 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE)와 Western blot analysis을 통해 조사한 결과, pCYASK5-1와 pCYASK5-2으로 형질전환된 E. coli는 각각 72kDa과 64kDa 크기의 cry11Aa 유전자를 발현하였다. 형질전환체의 모기살충성을 조사한 결과, pCYASK5-1과 pCYASK5-2을 가지는 형질전환체는 빨간집 모기유충(Culex pipiens)에 대해 각각 93%, 89%의 치사율을 보였다.

Keywords