Xenopus 동물극의 분리배양에서 Activin A와 IGF-1의 복합처리에 의한 전신의 분화와 IGF-I 고농도의 효과

Pronephros Induction by Combined-dose of Activin A and IGF-1, and High-dose Effect of IGF-1 in Xenopus Animal Cap Assay

Xenopus 수정란의 동물극분리편에 IGF-1(Insulin-like Growth Factor-1)을 고농도로 처리해 주었을 때의 기관유도효과를 실험하였다. Activin A는 동물극 분리배양조직으로부터 다양한 기관을 분화시키며 이러한 효과는 처리 시간과 농도에 의존한다. 본 연구에서는 activin A 뿐만 아니라 IGF-1을 복합처리하여 특정 기관의 분화양상을 관찰하였다. Activin A는 100ng/ml 의 농도로, IGF-1은 0-500 ng/ml의 범위로 조합 처리하였다. 분리편은 정상배가 st. 43에 이를 때까지 배양하였으며, 이때 activin A를 100ng/ml의 고농도로 처리하면 조직이 파괴되는 것이 일반적이다. 그리고 신관의 발생에 대해서는 activin A와 retinoic acid의 복합처리가 매우 효과적인 방법으로 알려져 있으나, IGF-1의 첨가에 의해 신관을 비롯한 다른 조직들이 분화되었다. 또한, 눈의 분화는 activin A 1-100ng/m1와 IGF-1 500ng/ml의 농도범위에서 일어났다. Activin A의 저농도 (1ng/ml)처리에서는 혈구양세포가 분화하고 배양조직은 풍선처럼 부풀게되나 IGF-1의 첨가로 눈이 발생하게 되어 activin A상의 눈의 발생농도범위가 확대되었다.

The induction of nephric duct from Xenopus presumptive ectoderm(animal cap) was studied and the high-dose ef-fect of IGF-1 was investigated. Activin A induce various organs from cultured animal cap explants and the effects are time and dose-dependent. On the induction of nephric duct, the combined-dose of activin A and retinoic acid was very efficient method in reference study. In present study, we used IGF-1 as well as activin A as a combined growth factor. The concentration ranges of growth factors were activin A l00ng/ml an IGF-1 0-500ng/m1. Explants were cultured in combined solution for 3days to the normal embryo arrives at st. 43. In general, when the explant was cultured in high concentration(l00ng/ml) of activin A, it was destroyed, however, nephric duct and other tis-sues were differentiated by adding IGF-1. In addition, eye induction by adding IGF-1 500ng/ml to activin A 1- 100 ng/ml solution was studied. The low concentration of activin A(1ng/ml) have blood-like cell inducing effect and the explant was balloon-shaped, however, the high dose combination with IGF-1 extended the range of eye inductive concentration of activin A.