Studies on Bioactive Polysaccharide Isolated from Agaricus bisporus

양송이 버섯의 생물활성 다당류에 관한 연구

During the screening for anti-complementary activity from 10 kinds of edible mushrooms, an alkali extract of Agaricus bisporus showed the highest activity through the complement fixation test. The crude anti-complementary material(AB-0) from Agaricus bisporus was obtained by the alkali extraction using 1 N NaOH containing 5% urea$(65^{\circ}C)$, followed by methanol reflux, dialysis and lyophilization. The fraction AB-O showed potent anit-complementary and anti-tumor activity against sarcoma-180 injected mice. The fraction AB-0 was divided into 5 fractions(AB-20, AB-40, AB-60, AB-80, AB-A) by gradual acetone precipitation. Among them fraction AB-20 having the highest activity and yield was found to contain 39% carbohydrate and 46% protein. The anti-complementary protein-bound polysaccharide AB-20 consisted of glucose, arabinose, xylose, galactose and mannose in a molar ratio of 6.49 : 1.98 : 1.24 : 1.00 : 0.71, respectively and its main component amino acids were alanine(20.59%), isoleucine(16.85%), glutamine+glutamic acid(14.12%) and leucine (13.83%). The anti-complementary activity of AB-20 was decreased greatly by periodate oxidation, but decreased slightly by pronase digestion. This indicates that polysaccharide moiety is corelated with the anti-complementary activity and that protein is also involved in the activity.

10종의 식용 버섯 자실체에 대한 항보체 활성 검색에서 가장 높은 활성을 나타낸 양송이버섯 자실체를 대상으로 항보체 활성물질의 추출조건을 조사하였다. 최적조건으로서 5% urea가 함유된 0.1 N NaOH 용액으로 $65^{\circ}C$에서 2시간동안 양송이버섯 자실체를 추출한 후 methanol 가용획분이 제거된 조다당 획분 AB-0를 얻었다. AB-0는 1 mg/ml에서 90% 이상의 높은 항보체활성을 나타내었으며 마우스에 이식된 sarcoma-180에 대하여 74%의 저지효과를 보였다. AB-0를 acetone 농도에 따른 침전 분획을 실시하여 AB-20, AB-40, AB-60, AB-80, AB-A의 5개의 획분을 얻었다. 이중 가장 높은 항보체활성과 수율을 나타낸 AB-20 획분은 탄수화물 39%, 단백질 46%를 함유하였으며, 구성당은 glucose, arabinose, xylose, galactose, mannose가 6.49 : 1.98 : 1.24 : 1.00 : 0.71의 비율로 존재하였고 구성아미노산은 isoleucine(12.60%), glutamic acid+glutamine(12.45%), valine(11.79%), alanine(11.46%), leucine(10.19%)와 aspartic acid, asparagine(10.56%) 등 이었다. Pronase 처리한 AB-20에서는 78.5%의 항보체활성을 나타내고 대조군에 비해 14.5% 감소하였으나, AB-20의 periodate 산화물에서는 활성이 42.6%로 50% 이상 크게 감소하였다. 따라서 양송이 버섯의 알칼리 추출물중 가장 강한 활성을 보인 AB-20의 주요 활성부위는 다당류이며 단백질도 일부 관여하는 것으로 생각되었다.