RAPD Identification of Genetic Variation in Ulvales Seaweed

RAPD기법을 이용한 갈파래목 해조류의 유전 변이 분석

The random amplified polymorphic DNAs (RAPD) technique was used to characterize seven isolates of the green seaweed Ulvales collected from Songjeng, Haeundae, Jumunjin, Dadaepo and Wando in Korea. Total DNA was extracted by the LiCl extraction method from thalli of green seaweed. The extracted DNA (3 ng) in $25{\mu}\ell$ reaction volume was amplified by 45 cycles of the polymerase chain reaction with arbitrary primers. Thirty-four primers resulted in 1227 PCR products ranged 240 bp to 1.5 kb of both conserved and polymorphic bands. Genetic similarities of the seven isolates calculated by Jaccard's equation were ranged from $7\%\;to\;36\%$. Monostroma nitidum (Wando) was shown to be most distantly related with the others based on genetic similarity and did not produce the amplified band of 630 bp, common in Ulvales using primer OPB-01 (CATCCCCTG).

해조류중 우리나라 전연안에 가장 흔히 분포하는 갈파래목 녹조류인 참홑파래와 구멍갈파래, 참갈파래, 잎파래, 실파래, 가시파래등을 대상으로 RAPD방법을 이용한 각 지역 개체간의 유전적 유사도를 조사하였다. Total DNA는 엽체로부터 LiCl를 사용한 DNA추출방법으로 분리하였으며, 추출된 DNA는 $3ng/{\mu}\ell$되게 희석한후 in vitro에서 arbitrary primer와 함께 45회 PCR amplification시켰다. 그 결과 34종류 primer들로부터 240bp에서 1.5kb의 다양한 크기로 증폭된 1227개의 전기영동상의 band를 볼 수 있었으며, Jaccard공식에 따라 그 유사도를 구하였다. 파래목의 유전적 유사도는 $7\%$에서 $36\%$범위의 유사도를 보였다. 그중 참흩파래가 다른 갈파래과들로부터 가장 낮은 유사도값을 보여주었으며, 또한 primer OPB-01 (CATCCCCCTG)을 사용하였을때 갈파래과에서 공통적인 630bp크기의 생성물을 생산하지않는 특징을 나타내었다.