대한두경부종양학회지 (Korean Journal of Head & Neck Oncology)
- 제12권2호
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- Pages.169-176
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- 1996
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- 1229-5183(pISSN)
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- 2586-2553(eISSN)
경부 결핵성 임파선염 환자에서 PCR-RELP를 이용한 결핵균의 검출 및 확인
Detection and Identification of Mycobacterium Tuberculosis in Patients with Tuberculous Cervical Lymphadenitis by PCR-RFLP
- 이상숙 (계명대학교 의과대학 병리학교실) ;
- 조영록 (계명대학교 의과대학 병리학교실) ;
- 전지민 (계명대학교 의과대학 병리학교실) ;
- 최용석 (계명대학교 의과대학 병리학교실) ;
- 손은주 (계명대학교 의과대학 병리학교실) ;
- 박남조 (계명대학교 의과대학 병리학교실) ;
-
박준식
(경북대학교 의과대학 이비인후과학교실)
- Lee Sang-Sook (Department of Pathology, School of Medicine, Keimyung University) ;
- Cho Young-Rok (Department of Pathology, School of Medicine, Keimyung University) ;
- Chun Ji-Min (Department of Pathology, School of Medicine, Keimyung University) ;
- Choi Yong-Seok (Department of Pathology, School of Medicine, Keimyung University) ;
- Sohn Eun-Ju (Department of Pathology, School of Medicine, Keimyung University) ;
- Park Nam-Cho (Department of Pathology, School of Medicine, Keimyung University) ;
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Park June-Sik
(Department of Otolaryngology, University School of Medicine, Kyungpook National)
- 발행 : 1996.11.01
초록
결핵의 진단은 특징적 병리조직양상, 항산균 염색에 의한 균 증명과 M. tuberculosis균 배양으로 이루어지나 형태적으로는 결핵이 의심되더라도 항산균이 조직표본이나 도말에서 검출되지 않거나 M. tuberculosis가 배양되지 않아 정확한 원인적 진단이 불가능할 경우가 많다. 이에 저자들은 경부 결핵성 임파선염으로 적출되어 보내어진 경부 임파선 조직의 신선한 조직이나 통상적으로 처리되어 제작된 파라핀 블록을 이용하여 M. tuberculosis에 특수한 반복성 DNA sequence인 IS986를 표적으로 한 primers을 사용하여 nested PCR방법을 이용하여 예민도가 높은 M. tuberculosis 검출로 빠른 시간 내에 결핵을 진단하고자 본 연구를 실시하였다. 최근 유전자 기술의 진보로 M. tuberculosis의 여러 항원들의 유전자가 클론화되고 그 염기 배열이 밝혀졌으며 이에 저자들은 결핵의 확진을 위하여 파라핀 포매조직을 대상으로 nested PCR에 의한 188bp의 DNA를 증폭한후 증폭한 DNA분절의 염기 배열을 결정한 후 Bst UI와 Hha I 효소를 이용한 소화과정을 거친 후 restriction fragment length polymorphism(RFLP)을 은염색에 의해 그 패턴에 의해 M. tuberculosis를 확인하고 또한 다른 종의 Mycobacteria를 배제시킬 수 있었다. 본 방법은 1
Tuberculous cervical lymphadenitis is still an important cause of neck mass in Korea. Tuberculosis is an important differential diagnosis in patients of cervical lymphadenopathy. Rapid and sensitive test for the diagnosis of tuberculosis is essential for the approapiate treatment. Up to now, conventional diagnostic methods for M. tuberculosis were acid-fast bacilli(AFB) stain and culture of M. tuberculosis. The direct microscopic examination of AFB by Ziehl-Neelsen stain is rapid, but often negative. The culture for M. tuberculosis is time-consuming, taking 4 to 8 weeks. Recently various methods to detect Mycobacterial DNA, including PCR and restriction fragment length polymorphism(RFLP) analysis have been reported. Here we represent a simple method for the confirmation of M. tuberculosis and exclusion of the other Mycobacterial species by RFLP analysis and silver staining of polyacrylamide gel electrophoresis after nested PCR for a repetitive DNA sequence(IS986) specific for M. tuberculosis from fresh or paraffin-embedded biopsy specimens. This result leads us to conclude that this method is simple, rapid and possibly applicable to confirm M. tuberculosis and rule out the other Mycobacteria species from the clinical specimens in the clinical laboratories.
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