Ammonia Microdiffusion and Colorimetic Method for Determining Nitrogen in Plant Tissues

암모니아 확산 및 발생에 의한 식물조직의 질소분석 방법

Ammonia microdiffusion method and colorimetric measurement are described for the nitrogen determination. The diffusion of ammonia could be successfully induced by using a microdiffusion cell. It is a simple and rapid technique, which is suitable for transforming the nitrogen in digests into $NH_4CI$ for the colorimetric N determination with ammonia color reagent. Above 99% of N recovery were obtained with microdiffusion up to 15 hours. The coloration method of collected $NH_4CI$ for the colorimetric N determination was also estabilshed with a scanning in U.V. spectrophotometer. Under the proposed coloration method (0.5 mL of sample digest, 4.0 mL of $H_2O$ and 0.5 mL of ammonia color reagent), a maximal absorbance was observed at 410 nm. The kinetic measurement of absorbance showed a high stability from 5 to 45 minutes after color development. Absorbance was directly proportional to the amount of $NH_4^+-N$ present. The microdiffusion-ammonia coloration method was successfully applied to the nitrogen determination in the forms of protein-N or total -N in plant tissue. Comparing with Kjeldahl distillation method, the values obtained with described method were slightly higher and more reliable.

암모니아 확산 및 암모니아 발색후 자외선 분광광도계에 의한 질소분석방법을 설정하기 위한 실험을 실시하였다. 미세확산용기(Conway microdiffusion cell)을 이용해 켈달소화 후 무기질화된 질소를 NaOH에 의한 알칼리화 및 HCI에 의한 산화반응을 통하여 $NH_4^+-N$으로 유도하였다. 암모니움 베이스의 표준용액을 이용하여 확산시간에 따fms 전소함량 및 회수율를 측정한 바 15시간 이상 반응으로 99% 이상의 질소회수율을 보여주었으며, 반복간 높은 재현성을 나타내였다. 회수된 $NH_4Cl$의 발색반응을 자외선 분광광도계에서 검토하여 발색반응제의 조성븐 조성하였다. O.5ml의 시료, 4.0ml의 증류수 및 O.5m1의 암모니아 발색제를 혼합하여 반색시켰을 때 410nm에서 최대흡광도를 주엇고, 발색후 5~45분간의 흡광도는 매우 안정하였다. 표준용액의 $NH_4^+-N$의 함량과 흡광도 간에 고도의 정의 상관관계가 인정되었다. 미세확산-암모니아 발색반응에 의해 분석한 식물체 시료의 단백질태 및 총 질소함량은 켈달-증류방법에 의해 얻어진 분석값과 잔 일치하였으며 시료반복간에는 높은 재현성을 보여주었다.