Characterization of Synechocystic PCC6803 transformed with cryIVD gene of Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 and its mosquitochidal effect on Anopheles sinensis

Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 cryIVD 유전자로 형질전환된 Synechocytis PCC6803의 특성과 학질모기에 대한 살충효과

  • 이대원 (서울대학교 농생물학과) ;
  • 박현우 (서울대학교 농생물학과) ;
  • 김호산 (서울대학교 농생물학과) ;
  • 진병래 (서울대학교 농생물학과) ;
  • 유효석 (서울대학교 농생물학과) ;
  • 김근영 (농촌진흥청 잠사곤충연구소) ;
  • 강석권 (서울대학교 농생물학과)
  • Published : 1996.03.01

Abstract

For the effective control of mosquito larvae, Anopheles sinensis, the expression vector pCYASK5-1 containing cryIVD gene of Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 was constructed and transformed into the cyanobacterium Synechocystis PCC6803. The transformants were selected on BG-11 medium containing kanamycin. The expression of cryIVD gene in transformant was confirmed by SDS-PAGE and Western blot analysis. The mortality of A. sinensis larvae was scored for 3 days. Furthermore, growth and distribution rate of transformant were examined. The results showed that Synechocystis PCC6803 transformed with cryIVD gene of B. thuringiensis subsp. morrisoni PG-14 was highly toxic to A. sinensis larvae, demonstrating that it will be a potential agent for mosquito control.

Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni PG-14의 cryIVD 유전자를 포함하고 있는 발현벡터 pCYASK5-1을 제작하여 Synechocystis PCCC6803에 형질전환시킨 후, 학질모기(Anopheles sinensis)유충에 대한 독성을 검정하였다. Kanamycin이 포함된 BG-11배지에서 선발된 형질전환체의 cryIVD 유전자 발현은 SDS-PAGE와 West-ern blot분석으로 확인하였다. 형질전환체는 A. sinensis 유충에 대해 높은 독성을 나타내었으며, 성장은 야생주인 Synechocystis Pccc6803과 유사하였다. 또 수심에 따른 형질전환체의 분포도 조사에서 전체적으로 살충농도의 세포수로 분포함을 확인하였다. 이러한 결과들은 B. thuringiensis subsp. morrisoni PG-14의 cryIVD 유전자로 형질전환된 Synechocystis PCCC6803이 모기유충 방제에 효율적으로 이용될 수 있음을 나타내었다.

Keywords