Characteristics of Recombinant CHO Cell Growth and Erythropoietin Production in Serum-Containing Media and Serum-Free Media

혈청배지와 무혈청배지에서의 재조합 CHO 세포 성장과 Erythropoietin 생산

We have investigated the characteristics of recombinant CHO cell growth and erythropoletin(EPO) production at different concentrations of serum and inoculation density. Cell growth and EPO production were increased with the increase of serum concentration and inoculation density. Enhancement of CHO cell growth and EPO production by medium exchange using serum-free medium at the growth phase of cells was studied. It was found that the exchange of culture medium with serum-free medium was favorable for growth of cells and production of EPO. The maximum number of cell and concentration of EPO obtained by exchanging culture medium were $6.2{\times}105cells/$\textrm{cm}^2$ and 7,470units/m1, respectively, compared to $2.1{\times}105cells/\textrm{cm}^2$ and 2,380units/m1 in serum-containing medium without medium exchange. It was observed that CHO cell growth was correlated with EPO production in serum-free media.

CHO 세포를 0.5%, 1 %. 2%, 3%, 4% 및 5% 놓도의 FBSd를 함유한 MEMa 배지에 $1{\times}10^4cells/\textrm{cm}^2 와 2{\times}10^4cells/\textrm{cm}^2$의 초기 농도로 정치배양하여 세포 성장과 EPO 생산 특성을 조사하였다. 혈청 농도와 접종 농도를 증가시킴에 따라 세포 증식 속도와 최대 세포 농도가 증가하는 경향을 보였으며, 적절한 혈청 농도의 선택이 세포 성장의 최적화에 필 요하다고 할 수 있다. 세포 성장 도중에 무혈청배지로 교환한 결과 세포 성장과 EPO 생산이 증가되었다. 배지를 교환하지 않았을 경우 세포 성장이 최대 ($2.1{\times}10^5cells/\textrm{cm}^2$)에 도달된 후 급격히 세포농도가 감소하는 높은 사멸율을 보이고, EPO의 최대 농도 도 2,380units/mL에 불과하였으나, 무혈청배지로 교환한 배양에서는 세포 성장이 크게 증가하여 $6.2{\times}105cells/$\textrm{cm}^2$의 최대 세포농도와 7,470units/mL 의 EPO 농도를 얻었다. 따라서 CHO 세포 성장과 E EPO 생산과는 상호 연관이 있으며, 세포배양으로 EPO 생산을 극대화하기 위해서는 CHO 세포의 고 농도 배양이 필요하다고 할 수 있다.