Ontogeny and Characterization of Major Haemolymph Protein(MHP) in Helicoverpa assulta

담배나방 (Helicoverpa assulta)의 발생중 Major Haemolymph Protein(MHP)의 변화 및 특성

A persistent major haemolyruph protein (MHP) was confirmed, and its ontogeny and physicochemical charadedstics were investigated in Helicoverpa assulta. The MHP existed continually during larval-pupal-adult development, and its ontogeny was similar to that of total haemolymph protein concentration during development. Its content increased with larval growth, and kept to high level during pupal-adult development except for temporary decrease at the early pupal and adult stages. The MHP was purified by ammonium sulfate precipitation, gel filtration and ion exchange chromatography. The purified MHP was determined to be hexamer glycolipoprotein (pI 5.9, M.W. 414kDa) consisted of single type subunit (69kDa). Amino acid analysis suggested that the MHP contained a relatively high content of aromatic amino acids (18.27 mole % of tryptophan, 7.47 mole % of tyrosine and 6.51 mole % of phenylalanine) compared to storage proteins from other insects. Immunodiffusion test and electrophoretic analysis of the organ proteins (gut, fat body, and Malphigian tubule) suggested that the major haemolymph protein was present in the fat body.

담배나방 (Helicoverpa assulta)의 발생기간 중 존재하는 major haemolyruph protein (MHP)을 확인하였으며, 그 발생에 따른 변화상 및 물리화학적 특성을 조사하였다. MHP는 유충-용-성충의 발생단계에서 확인되었으며, 그 함량은 유충의 성장에 따라 증가하여 용기와 성충기 동안에도 높게 유지되고 용초기와 성충 초기에서 일시적인 감소를 보여, 총 혈림프 단백질의 농도 변화와 유사한 변화양상을 보였다. ammonium sulfate precipitation, gel filtration 그리고 ion exchange chromatography를 통해 정제한 MHP의 전기영동 분석 결과, 단일 구성소 단위 (69 kDa)가 hexamer를 이룬 분자량 414kDa의 glycolipoprotein (pI 5.9)인 것으로 확인되었다. MHP의 아미노산 조성에 있어서 18.27 mole % 의 tryptophan, 7.47 mole % 의 tyrosine and 6.51 mole % 의 phenylalanine이 검출되어 다른 곤충류의 저단백질들에 비해 비교적 높은 aromatic amino acid의함량을 보였다. 지방체, 장, 말피기관 단백질의 전기영동 및 이들 단백질과 anti-MHP간의 immunodiffusion test 결과 MHP는 지방체에 존재하고 있음이 확인되었다.