Enhencement of Specificity of PCR Amplification of GC-rich Mycobacterium paratuberculosis DNA by Denaturants

Denaturant에 의한 Mycobacterium paratuberculosis DNA의 PCR 증폭의 특이성 증진

  • 김두 (강원대학교 축산대학수의학과) ;
  • 창영후 (미국 코넬대학교 수의과대학 진단실험실)
  • Published : 1995.06.01

Abstract

GC 함유량(72%)이 높은 Mycobacterium paratuberculosis의 DNA의 PCR 증폭시 특이성과 생산성을 높이기 위하여 PCR 반응액에 denaturant인 DMSO, glycerol, formamide, Tween 20과 NP 40를 첨가하였다. Denaturant를 첨가하지 않은 상태의 PCR에서는 다수의 비특이적인 DNA가 관찰되었으며 표적 DNA 생산량이 낮았다. 모든 denaturant는 PCR의 특이성과 생산물의 생산량을 증가시했으며, 이들 중 DMSO, glycerol, farmamide와 NP 40는 높은 농도에서 생산량을 증가시켰다. Tween 20은 낮은 농도에서 생산량을 증가시켰다. Denaturant를 첨가하였음에도 불구하고 대부분의 반응에서 1 또는 2개의 비특이적인 DNA가 관찰되었다.

Keywords