랫드 고환세포의 배양조건 설정에 관한 연구

Establishment of Incubational Conditions for Rat Testicular Cells

화합물질의 개발사용 및 환경오염 물질의 증가로 인하여 남성수태능력에 영향을 미치는 물질이 증가하고 있는 형편이다. 따라서 신속하고 경제적으로 남성 수태능력 영향물질을 평가하기 위하여 랫드의 고환세포를 이용한 남성 수태능력시험법을 개발하고자 본 시험을 실시하였다. 랫드의 고환 세포로부터 주요한 기능을 가진 Sertoli cell과 Leyding cell을 효소처리, 필터 그리고 percoll gradient과정을 거쳐 각각 분리하였다. 분리된 두 종류의 세포는 32$\circ$C에서 초기 배양한 후 37$\circ$C에서 계속 배양하였다. 본 배양조건에서 두 종류 세포는 양호한 발육을 보였으며 약 2주간의 배양이 가능하였다. Sertoli cell은 3주령의 랫드에서 분리가 잘되었고 Leydig cell은 85.7%의 생존율을 보였다. 이상의 결과와 같이 랫드의 고환세포중 Sertoli cell과 Leyding cell을 분리 배양하였으며, 앞으로 독성물질의 영향을 평가하기 위한 생화학적 및 구조적인 index 설정을 위한 연구가 필요하다고 사료된다.

This study of culturing testicular cell types in vitro has potential to be an invaluable tool for assessing the mechanisms of testicular toxicity, especially those of intragonadal interaction and spermatogenesis. Combined with the Sertoli/germ cell cultures, Leydig cells provide comprehensive and detailed information on the action of testicular toxicants at the level of the testis. Sertoli/germ cell were isolated and incubated well in vitro from 20~30 g rats and Leydig cells from 250~300 g rats. The Sertoli cells isolated from the testis of the SD rats grew into monolayer on about the 2nd~3rd day of culture, an appreciable cell increment being observed between the 4th~5th day. The Leydig cells isolated from the testis of the SD rats grew into a monolayer on about the 3rd-4th day of culture, an appreciable cell increment being observed between the 5th-7th day. These results suggest that Sertoli and Leydig cells can be cultured as a male fertility evaluation method alternative to the in vivo/conventional fertility test method and further study for the physio-chemical determination is needed.