Axenization of Entamoeba histolytica, a Korean strain YS-27

이질아메바 한국분리주 YS-27의 무균 배양화

In the present communication, YS-27, a Korean strain of Entnnloeba histoIWtica is described for the isolation and establishment of axonic cultivation. 5. histoLvticc, designated as strain "YS-27" was isolated from the pus of a hepatic abscess obtained from a 72 you old inpatient of August 10, 1969. Specimens, were obtained by needle aspiration, inoculated immediately and weekly cultured in a modified diphasic medium at 37℃. Strain YS-27 had been maintained for more than 15 years by weekly subculture until February, 1985. These cultures were transferred to a monoxenic TTY-SB medium seeded with a trypanosomatid of the genus CyithidiG. Penicillin G, 2 to 10 H 103 International units and Streptomycin, 2 to 10 mg per 100 ml, were added to the cultures to eliminate the bacteria. After more than one year later, these two organisms were well maintained by transfer every 3 or 4 days until .January. 1986 at 37℃ in TTY-SB medium in the absence of other microorganisms. These monoxenic cultures were then transferred to TYI-S-33 medium. Strain YS-27 alone had not been growing at the time of transfer, but when overlaid with Crithinia at intervals of 3 to 4 days, strain YS-27 propagated well. The Clthidio died out several weeks later after several passages. Beginning in April, 1986, strain YS-27. was successfully established in axonic culture in TYI-S-33 medium and has been maintained in continuous culture and multiplied well to present.

1969년 8월 10일 서울 고려병원의 입원친자 김00의 간농양에서 채취한 고름을 modified diphasic배지(Faust and Russell 1964)에서 배양하여 이필아메바 한국븐리쿠 YS-27을 얻었다. 이를 1985년 2월부터 TTY-53 배지에 넣어 Crithidia와 함께 $37^{\circ}C$에서 혼합 배양하였으며 3~4일 간격으로 계대하였다 Crithidia는 Dr. L.S. Diamond(미. NIH)로 부터 분양받아 TW-SB 배지 10 ml에 500만개씩 넣어 $25^{\circ}C$에서 1주 간격으로 계대 배양하였다. Monoxenic 배지인 TIY-SB 에서 이질아메바와 Crithidia를 혼합배양하면서 세균 제거를 위하여 배지 100 ml 당 Penicilin G 2,000-10,000 I.U.와 Streptomycin 2-10 mg을 첨가하였으며 세균이 완전히 제거되고 monoxenic 상태로 되기까지 1년 이상 걸렸다. TIY-SB배지에러 arsenic배지 TYI-5-,B3으로 바꾸었더니 저음 이직아메바 영양형의 증식이 피지 않았으나 Crithdia를 넣어 주었더니 이질아메바의 증식이 잘 되었다. 3-4일 간격으로 계대 배양1하였으며 수수간 배양후에는 Crithidia를 보충하지 않아도 이질아메바 영양1형만 잘 증식되었다. 이질아메바 한국분지주 YS-27은 1995년 10월 현재 TYI-5-33 배지에서 무균적으로 지속적으로 계대 배양되고 있으며 영양형의 증식도 양호하다.