Identification of surface antigen of Trichomonas vaginalis

질편모충의 표면항원 분석

Plasma membrane proteins of a Korean isolate of Trichomonus vofinalis HY-1 were fractionated for antigen analysis. Homogenates of T. vaginalis were fractionated by the differential centrifugation using sucrose step-gradient method. The interface layer from the 25%/45% sucrose was collected as a plasma membrane fraction and its purity was examined by transmission electron microscopy. The antigenicity of plasma membrane fraction was analysed by enzyme-linked immunoelectrotransfer blot technique with immune rabbit serum and compared with surface antigen labelled with N. hydroxysuccinimide-biotin. The fluffy fraction of 25%/45% sucrose interface was homogeneous and membrane particles were present as extended sheet and concentric vesicles showing typical trilamellar appearance under transmission electron microscope. Seven fractions at 40, 50, 60, 110, 130, 140 and 150 kDa were identified as the antigenic membrane proteins in EITB with anti HY-1 rabbit serum. The common band at 60 kDa was detected both in antigenic fractions of plasma membrane and surface protein labelled with NHS-biotin. This result indicates that this protein is considered as a major surface antigen of T. vaginalis. The role of this surface antigen at 60 kDa should be studied further.

질편모충 항원 분석의 일환으로 막항원의 분석을 시도하였다 수확 세척된 질편모충 HY-l의 homogenate를 sucrose step-gradient를 이용하여 differential centrifugation하였으며 25%/45%의 sucrose 경계면으로녁터 막분회을 얻었다. 분리된 막분회은 transmission electron microscopy를 통하여 순수 분리되었는지 확인하였고 효소면역 전기영동 이적법(EITB)을 이용하여 항원성을 관찰하였으며 그 결과는 다음과 같았다. 분리된 막분획은 투과전자 현미경상에서 extended sheet나 concentric vesicle의 형태가 거의 균질하게 분포하고 있었으며 막 분획에서 특징적으로 나타나는 trilaminal appearance를 보여 질편모충의 막분획이 순수 분리된 것으로 간주할 수 있었다. 분리된 막분획은 EITB상에 토끼의 항혈청과 반응하였을 때 46, 60, 110, 120, 130 및 150 kfDa에서 항원성이 있는 반응대가 관찰되었으며 N-hydroxysuccinimido-biotic으로 표지하여 분리된 표면항원의 녁획과 비교하였을 때 60 KDa의 항원 분획이 서로 일치하는 것으로 나타났다. 따라서 60 kfDa 의 항원 분획은 료면 항원임을 확신할 수 있었다.