Applied Biological Chemistry
- Volume 37 Issue 1
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- Pages.56-63
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- 1994
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- 2468-0834(pISSN)
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- 2468-0842(eISSN)
In vitro endonucleolytic cleavage of synthesized cucumber mosaic virus RNA by hammerhead ribozyme
인공적으로 합성한 오이모자이크 바이러스 RNA의 헤머헤드 ribozyme에 의한 시험관내에서의 절단
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Park, Sang-Gyu
(Department of Agricultural Chemistry, Taegu University) ;
- Hwang, Young-Soo (Biochemistry Division, Agricultural Biotechnology Institute, RDA)
- Published : 1994.02.28
Abstract
Oligonucleotides for a conserved region of the coat protein gene of cucumber mosaic virus (CMV) and a hammerhead structure ribozyme against CMV RNA were synthesized using a DNA synthesizer. Both strands of oligonucleotides were annealed and restricted with BamHI/SacI, then cloned into a plasmid pBS SK (+). The cloned CMV substrate and ribozyme were sequenced to verify correct constructions. In vitro transcriptions were carried out by using T7 RNA polymerase with BssHII or SspI digests of
오이모자이크 바이러스(CMV)의 외피단백질 유전자의 일정한 염기서열을 보유하는 부분과 CMV RNA에 대항한 헤머헤드(hammerhead) 구조의 ribozyme을 만드는 올리고뉴클 레오타이드(oligonucleotide, nt)를 DNA 합성기를 이용하여 제조하였다. 올리고뉴클레오타이드의 양쪽가닥을 서로 합친 후 제한효소 BamHl과 SacI으로 처리하여 플라스미드 pBS SK(+)에 삽입하였고 CMV 기질과 ribozyme 클론의 염기서열을 결정하여 확인하였다. 기질과 ribozyme 클론