Immunoreactivity of Radiolabelled Monoclonal Antibody and Sensitivity of Immunoradiometric Assay: Effect of Labelling Method and Specific Activity

동위원소 표지 단세포군항체의 면역반응성과 방사면역계수법의 예민도 : 표지방법 및 비방사능이 미치는 영향

When monoclonal antibodies are used in radioimmunoassay or immunoscintigraphic studies, post-labelling immunoreativity is a critical parameter. $^{125}I$ was incorporated to CEA-79 (anti CEA monoclonal antibody developed in Korea) by chloramine T and iodogen method with variable specific activities from $0.1{\mu}Ci/{\mu}g$ to $100{\mu}Ci/{\mu}g$. We used a new method to evaluate the immunoreactivites of modified antibody relative to the unlabelled native antibody from competitive binding assay. The effect of immunoreactivity and specific activity to the sensitivity of radioimmunometric assay was also evaluated. As a result, chloramine T method was better than iodogen method in radioiodination of CEA-79, because the immunoreactivity of antibody was relatively well reserved and more stable. New competitive binding assay was simple and effective to evaluate the change of immunoreactivity in radiolabelling. Antibody with high immunoreactivity and high specific activity improved the sensitivity of radioimmunometric assay, whereas antibody with high specific activity but low immunoreactivity didn't. The immunoreactivity and specific activity should be optimized according to the clinical un, and competitive binding method is useful in selection of optimal radiolabelling assay.

핵의학 분야에 사용되는 항체의 적절한 동위원소 표지법을 선택하는데는 표지항체의 면역반응성을 평가하는 것이 매우 중요한 일이다. 저자 등은 국내에서 개발된 CEA-79 단세포군 항체를 표지방법 및 비방사능을 $0.1{\mu}Ci/{\mu}g$으로부터 $100{\mu}Ci/{\mu}g$까지 달리하여 $^{125}I$ 표지를 시행한 후 면역반응성을 평가하고, 이 항체에 적절한 표지방법을 찾고자 하였다. 면역반응성의 평가에 있어서는 표지, 비표지 항체의 경쟁반응을 이용하여 표지항체의 비표지항체에 대한 상대적 면역반응성을 평가하는 새로운 방법을 시도해 보았다. 그 결과 CEA-79 항체의 강우, chlormine T법이 iodogen법보다 우수하였는데, 즉, chloramine T법으로 표지시에는 비방사능을 $100{\mu}Ci/{\mu}g$까지 높여도 면역반응성이 잘 유지되고 시간경과에 따른 면역반응성의 변화도 적었다. 본 연구에서 시도한 새로운 경쟁반응방법은 동위원소표지에 의한 항체의 면역반응성의 손상을 평가하는데 효과적이었으며, 기존의 세포결합 검사법보다 간편하였다. 또 항체의 면역반응성은 비방사능과 함께 방사면역계수법의 민감도에 영향을 미침을 확인할 수 있었다. 따라서 표지항체의 면역반응성과 비방사능은 그 용도에 따라 적정화되어야 할 것이며, 본 연구에서 시도한 경쟁반응방법은 적정한 동위원소 표지 방법을 선택하는데 유용할 것으로 사료된다.