대두 ${\beta}-conglycinin$ 유전자 발현의 전사 조절에 관한 연구 -(II) 대두 발달과정 중의 대두 배 인자 3의 역가 변화-

Transcriptional regulation of soybean ${\beta}-conglycinin$ gene expression: -(II) Developmental change of soybean embryo factor 3 activity-

대두 종자 저장 단백질의 일종인 ${\beta}-conglycinin$의 ${\alpha}'$subunit 유전자 upstream 영역에 결합하여 전사 조절에 관여하리라 추정되는 SEF3(soybean embryo factor 3)의 발현을 조사하기 위하여 대두 핵 추출물을 조제하였다. 두개의 AACCCA를 포함하는 SE3 DNA를 $^{32}P$로 표지한 후 gel mobility shift assay 탐침으로 이용하여 대두 발달 과정 중의 SEF3의 역가를 조사하여 본 결과, 개화 후 16일부터 32일까지의 역가는 증가하나 SE3-SEF3 결합체 이동도는 감소하였다. 핵 추출물을 alkaline phosphatase 처리하면 결합체의 이동도가 다시 증가하였으나 이 현상은 phosphate에 의해 저해되었다. 그리고 결합체의 형성은 반응 pH 6.8과8.5사이에서는 큰 영향을 받지 않았다.

Soybean nuclear extracts were prepared to examine the expression of SEF3 (soybean embryo factors 3), which binds to the upstream region of soybean ${\beta}-conglycinin$ ${\alpha}'$ subunit gene and is presumed to be a trans-acting factor for the expression of the gene. The relative levels of SEF3 binding activity in nuclear extracts of maturing soybean embryos were determined using the SE3 DNA probe containing two AACCCA hexanucleotides for gel mobility shift assay. The SEF3 activity increased in developing embryos from 16 to 32 days after pollination, whereas the mobility of the SE3-SE3-SEF3 complex decreased. The mobility of the complex was increased by the treatment of nuclear extracts with alkaline phosphatese, which could be inhibited by phosphate. Formation of the SE3-SEF3 complex was not affected by the binding buffer pH between 6.8 and 8.5.