간 조직내의 Retinoic Acid 검출 및 측정 방법

Detection and Measurement of Retinoic Acid in Human Liver Samples

비타민 A의 활성 대사물인 비타민 A arid(retinoir acid, Rh)를 사람의 간 조직내에서 처음으로 검출하고, 측정하는 방법을 고안하였다. Reverse phase HPLC에 gradient elution을 사용하는 이 방법은 Multiwavelength 검출법을 이용하여 RA, 비타민 A, 비타민 E 및 카로티노이드를 모두 약 30mg정도의 시료로부터 검출할 수 있었다. HPLC 분석에 소요되는 시간은 시료당 20분으로 상당히 신속하며 또 예민하다. 간 조직내의 총비타민 A량에 대한 Rh의 비율은 비타민 A의 축적량에 관계없이 일정한 편으로 약 $2.4\pm0.2%로$ 나타났다. RA의 간 조직내의 검출은 RA가 비타민 A의 체내 대사산물임을 다시 한번 확인시켰으며, 그 함량에 대한 정보는 총비타민 A량과 함께 비타민 A 영양 상태 판정에 보다 좋은 지표가 될 것이다. 특히 간 조직의 needle biopsy가 필요한 질병 상태의 경우, 비타민 A의 기능적 영양 상태판정을 가능하게 하여 질병의 진단 및 처치에 도움이 되리라 사료된다.

Retinoic acid. the active metabolite of vitamin A. was detected in the human liver for the first time using a new method. A rapid and sensitive technique has been developed using gradient-elution. reverse-phase high performance liquid chromatography. This assay. with simultaneous multiwavelength detection at 294nm, 325nm and 450nm after saponifcation of liver samples. allows us seperation and quantitation of vitamin E, retinoic acid, total retinoids and various carotenoids in one small sample. The proportion of retinoic acid to total retinoids in human liver appears to be quite $consistent(2.4\pm0.2%$ ). With low vitamin A storage in liver, detection at another wavelenth 354nm would increase the sensitivity for retinoic acid of small quantity This method of analysis could be used for other tissues like red blood cells, plasma or serum, also. Hepatic retinoic acid level with total retinoids and carotenoids would serve a better indicator of functional vitamin A nutriture especially for those with disease requiring needle biopsy of liver.