초록
$cI_{857}$ repressor 단백질을 대량으로 얻기위해 tac promoter 하류에 $cI_{857}$ 구조 유전자를 삽입하는 것을 검토하였다. $cI_{857}$ 유전자를 포함하는 DNA 단편을 plasmid PUC12를 이용하여 대량생산후, HphI으로 부분 분해하여 $cI_{857}$ 구조 유전자만을 취하고, tac promoter 하류에 삽입시켰다. 그리고 $\lambda$ phage $cI_{90}$에 의해 $30^{\circ}C$에서는 용원성을, $42^{\circ}C$에서는 용균성을 보이는 균주를 선택함으로 tac promoter 하류에 cI857 구조 유전자가 삽입된 pDR540-$cI_{857}$을 선택할 수가 있었다. 이 plasmid는 $lacI^q$ JM103 뿐만 아니라 각종 E.coli에서 $cI_{857}$-repressor 단백질을 균체 단백질당 약 17 까지 생산하였다.
Inserting the $cI_{857}$ structural gene in the downstream of the tac promoter for the overproduction of $cI_{857}$ repressor protein was studied. DNA fragment containing $cI_{857}$ ; repressor gene was amplified by using plasmid pUC12, and partially digested with HphI. Only the $cI_{857}$ structural gene isolated was inserted in the downstream of the tac promoter. Plasmid pDR540- $cI_{857}$ having the tuc promoter-$cI_{857}$ structural gene insert could be isolated by the immunity of cells resistant at $30^{\circ}C$ and cell lysis at $42^{\circ}C$ to $\lambda$ phage $cI_{90}$. The amount of $cI_{857}$ repressor as 17% of total cellular protein were produced by using general E. coli as well as $lacI^q$ JM103 having this plasmid.
