Partial Purification and Characterization of the Alkaline Protease from Baccillus sp.

Bacillus sp.가 생산하는 호알카리성 Protease의 부분정제 및 특성

An alkalophilic microoganism producing a detergent-resistant alkaline protease was isolated from soil and identified as Baeiltus sp. The alkaline protease has been partially purified by ammonium sulfate fractionation, DEAE-Cellulose, CM-Cellulose and Sephdex G-100 column chromatography. The purified alkaline protease was highly active at pH 12-13 toward casein and stable at pH values from 6 to ll. The optimum temperature for the enzyme reaction was $55^{\circ}C$. The enzyme was completely inactivated by diisopropyl fluorophosphate (DFP) indicating that the enzyme was serine protease, but considerabiy stable in the presence of surface active agents.

계명활성제 내성이 있으면서 호알카리성인 protease를 생산하는 미생물을 토양에서 분리하였다. 분리된 미생물을 형태적, 생리학적, 화학분류학적 및 5S RNA 분석으로 동정한 결과 Bacillus sp.인 것으로 판명되었다. 호알카리성 protease는 황산암모늄 분획, DEAE-Cellulose, CM-Cellulose, Sephadex G-100 column chromatogrphy로 분리, 정제하였다. 정제된 호알카리성 protease는 casein에 대하여 pH6.0에서 11.0 사이에서 안정성을 나타내었다. 분리된 효소의 작용 최적 온도는 $55^{\circ}C$이었다. 이 효소는 diisopropyl fluorophosphate(DFP)로 완전히 불활성화되는 것으로 보아 serine protease로 추정되며 계면활성제의 존재하에서도 안정하였다.