Molecular Cloning of Bacteriocin Gene and Biological Control of Plant Pathogen

Bacteriocin 생산 유전자의 Cloning 및 식물병원균에 대한 생물학적 억제

A strain of Erwinia spp. was selected from the soil for the production of bacteriocin to the root rot plant pathogen. Bacteriocin producing gene was not located on plasmid but on chromosome. Genomic library of Erwinia spp. were made by using pLAFR 3 as a vector system for cloning of the gene. It was been cloned and expressed in E. coli DH 5 . Bacteriocin producing colony was composed of pLAFR 3 vector and 3.0 kb EcoRI fragment of Erwinia spp. ehromosomal DNA. The inserted fragment (3.0 kb) was possessed a EcoRI and BarnHI restriction sites.

본 실험에서는 채소 등에서 연부병을 유발시키는 원인균의 일종인 Erwinia herbicola의 생육을 저해시키는 bacteriocin 생산균주를 경작지로부터 분리하여 몇 가지 특성을 조사하였다. 분리균주가 생산하는 bacteriocin은 배양 48시간안에서 가장 많은 축적량을 보였고 bacteriocin 생산유전자는 chromosome 상에 있음을 확인하였다. 또한 Erwinia 속의 chromosomal DNA 를 분리하여 EcoRI으로 절단하고 pLAFR3 vector의 EcoRI site에 cloning 하여 bacteriocin을 생성하는 형질전환체, 두 개체를 얻었다. 이들 중 bacteriocin 생산능이 우수한 CH 49 clone의 제한효소 지도를 작성하였다. Vector 내에 삽입된 3.0kb insert 내에 BamHI과 NglII site가 각각 한 개씩 있음을 밝혔다.