Studies on the Multiplication and Induction of Hybrid Plant in Cremastra appendiculata Use the the Embryo and Tissue Culture

배배양 및 조직배양을 이용한 약난초 (Cremastra appendiculata) 의 증식과 잡종식물의 유도에 관한 연구

It was determined optimal Culture conditions and suitable growth regulators for seed germination, growth of callus, and protoplasts derived from cultured and mesophyll cells in Gremastra appendiculata. Induction of fusion between protoplasts of cultured and mesophyll cells was examined. The best conditions of seed germination and growth of callus were achieved on Hyponex medium contained plant growth regulators(2mg/l 2, 4-D, lmg/l Kinetin). Viability and regeneration of cell wall in protoplasts was determined with fluorescence microscope. Also, fused protoplasts were achieved by using PEG solution between protoplasts of cultured and mesophyll cells.

약난초는 내장산 이남에서만 자생하는 상록성 난으로 관상용 뿐 아니라 점질이 높은 구경은 약용(점활제)으로써 이용가치가 높은 중요한 자원식물중의 하나이다. 본 연구에서는 이와같은 약난초의 다량증식을 위하여 몇 가지 실험을 하여 다음과 같은 결과를 었다. Green pod를 이용하여 미숙종자를 개체로 유도시키는 것은 그 유도율이 낮았고 생장점을 이용, 캘러스를 유도하여 PLB를 형성시켜 개체로 유도하는 것이 용이하였다. 그러나 미숙종자의 이용도 배지조건등의 개량으로 가능하리라 사료된다. 캘러스의 형성은 Hyponex배지에 2.4-D(2mg/l)와 Kinetin(1mg/l)을 첨가하였을 때 높았다. 한편 업육조직 및 배양세포로부터 분리시킨 원형질체는 70%이상의 생존력을 나타내었고 형광현미경 관찰을 통하여 세포벽의 재생을 확인하였다. 이와 같은 실험결과는 자생란의 다량증식 뿐 아니라 잡종난 식물체를 유도하는 제반 실험에 응용될 수 있는 기초 자료가 될 수 있으리라 사료된다.