Overexpression and Characterization of Eukaryotic Peptide Hormone Precursors in E. Coli.

대장균에서 진핵세포 펩타이드 호르몬 전구물질의 대량생산과 특성규명

In order to have a handle on the availability of eukarvotic peptide hormone precursors, a cDNA encoding angler fish prepro-SRIF I was manipulated so that it can be produced in large quantity from heterologous E. coli cells. Using T7 overexpression system, fusion constructs between the T7 phage coat protein Sl0 and the prepro-SRIF were made and modified as desired. From the host E. coli strain, BL21 DE3, harboring these plasmid constructs, three different SRIF related polypeptides were expressed in large amount and characterized. The results confirm the exact construction and authenticity of the overexpressed proteins from E. coli cells. The importance of this heterologous overexpression in hard to get peptide hormone precursors as well as the suitability of the target peptide hormone SRIF for this approach are discussed.

대장균에서 진핵세포의 펩타이드 호르몬 전구체를 대량으로 생산할 목적으로 T7 overexpression system을 이용하여 angler 어류의 prepro-SRIF I 유전자와 T7 phage coat 단백질 S10 유전자를 결합시켜 일련의 융합유전자를 합성하였다. 이 융합유전자를 가지고 있는 숙주 대장균, BL21 DE3는 3가지 종류의 서로 다른 SRIF 관련 폴리펩타이드를 대량 합성하였다. 본 연구에서는 대량합성된 폴리펩타이드의 특성을 규명하였으며, 펩타이드 호르몬 전구체를 얻기 어려운 이종이에서의 대량발현의 중요성과 표적 펩타이드 호르몬인 SRIF의 적용성을 논의하였다.