난백 및 이온교환수지의 전처리 조건이 난백 Lysozyme의 추출에 미치는 영향

Effects of Egg White and Ion Exchange Resin Pretreatment on Separation of Egg White Lysozyme

난백으로부터 lysozyme을 효과적으로 추출하기 위하여 난백의 전처리와 이온교환수지의 선택 및 전처리 등 추출조건에 관한 연구를 실시한 결과는 다음과 같다. 난백의 점도저하를 위하여 2,000 rpm의 속도로 30분간 균질하고 45분간 초음파처리를 실시한 결과 난백의 겉보기 점도가 3 cp까지 떨어졌으나 pH의 변화에 따라서는 점도의 차이가 크지 않았다. lysozyme의 추출을 위한 이온교환수지의 선택을 위하여 Amberlite IRC-84 등 6종류의 수지에 대한 Lysozyme 흡착력을 검토한 결과 CM-Sepdex C-25＞Duolte C-464＞Amberlite C-50＞Dowex MSC-1＞Amberlite IRC-50＞Amberlite IRC-84의 순으로 lysozyme 흡착력이 높았으나 난백에의 적용시 CM-Sephadex C-25의 경우에는 난백의 유출이 용이하지 않은 것으로 나타나 Duolite C-464가 가장 적합한 것으로 나타났다. 양이온교환수지인 Duolite C-464 의 양이온형태 결정을 위하여 $Na^{＋}$, $NH_4$$^{＋}$. $K^{＋}$ form으로 만들어 lysozyme 흡착력을 검토한 결과 $Na^{＋}$ ＞ $NH_4$$^{＋}$ ＞ $K^{＋}$의 순으로 나타나 $Na^{＋}$ form으로 하는 것이 가장 효과적인 것으로 나타났다. Duolite C-464의 $Na^{＋}$form을 이용하여 lysozyme을 추출할 경우 rinse buffer는 pH6.5의 0.1M sodium phosphate buffer, eluting solution은 10% ammoniun sulfate가 효율적이었다. Lysozyme을 추출한 전, 후 난백의 가공적성을 측정한 결과 기포력은 추출전의 난백액에 대하여 85.3%로서 다소 떨어졌으나 가열한 난백겔의 경우에는 추출전, 후 색택의 변화가 크지 않았으며 조직감의 경우에도 hardness가 다소 떨어졌으나 elasticity는 오히려 13%가량 증가되었다.

Pretreatment of egg white and ion exchange resins was attempted to separate lysozyme from egg white efficiently. Apparent viscosity of egg white could be decreased to 3cp by homogenization for 30 minutes at 2, 000rpm and ultrasonication for 45 minutes. The result of testing adsorption capacity of lysozyme was as follows； CM-Sephadex C-25 ＞Duolite C464＞Amberlite C-50＞Dowex MSC-1＞Amberlite IRC-50＞Amberlite IRC-84. Although CM-Sephadex C-25 showed highest adsorption capacity of lysozyme, egg white could not eluted easily. Duolite Cf64 was selected based on relatively high lysozyme adsorption and good egg white eluting property for separation of egg white lysozyme. Na$^{＋}$ form of Duolite C-464 was most effective on adsorption of Iysozyme. To separate lysozyme from egg white efficiently rinse buffer and eluting solution were selected 0.1M sodium phosphate buffer at pH 6.5 and 10% ammonium sulfate respectively. After separating lysozyme from egg white, foaming power of egg white was decreased to 85.3%. Color of egg white gel was not changed while hardness of egg white gel was decreased by 30% after separating lysozyme. However, elasticity of egg white gel was increased by 13% in lysozyme-separated egg white.