수성 2상계를 이용한 알파-아밀라제의 생산

Production of $\alpha$-Amylase using Aqueous Two-Phase System

세포외 효소를 효율적으로 생산하기 위한 새로운 발효시스템으로서 수성 2상계를 시험하였다. 실험대상으로는 Bacillus amyloliquefaciens 균주에 의하여 $\alpha$-amylase를 생산하는 시스템을 선정하였다. Polyethylene glycol 5%, dextran 7%, 그리고 발효액이 88% 포함된 수성 2상계 발효시스템에 의하여 $\alpha$-amylase의 생합성은 25% 정도 증가하였으며 효소의 비활성화는 관찰되지 않았다. 또한 Polyethylene glycol 이 효소의 생합성을 증진시키는 것으로 관찰되었다. 효소의 생합성을 증가시키며 동시에 효소를 발효액으로부터 분리하기 위하여는 polyethylene glycol을 성장도중에, dextran은 효소의 활성이 최고에 달한 후에 발효액에 가하는 발효방법이 바람직하다.

Aqueous two-phase fermentation system was tested for the overproduction of extracellular enzyme through $\alpha$-amylase fermentation by Bacillus amyloliquefaciens. By employing aqueous two-phase system $\alpha$-amylase activity showed 25% increase compared to the result using regular medium and no deactivation of the enzyme was observed. The presence of polyethylene glycol was observed to promote the enzyme production, while to inhibit the growth of the microorganism. It is recommended that polyethylene glycol be added during the log-growth phase and dextran be added after the enzyme activity reaches Its maximum for efficient $\alpha$-amylase fermentation and in situ recovery of the enzyme.