Immunological Analysis of Endotoxin Proteins Produced by Bacillus thuringiensis serovar. kurstaki HD1 and HA73

Bacillus thuringiensis serovar. kurstaki HD1과 HD 73이 생산하는 내독소 단백질의 면역학적 분석

  • 오상수 (농촌진흥청 농업기술연구소 유전공학과) ;
  • 이영종 (농촌진흥청 농업기술연구소 유전공학과) ;
  • 김창규 (건국대학교 축산가공과) ;
  • 구본성 (농촌진흥청 농업기술연구소 유전공학과) ;
  • 김종배 (건국대학교 축산가공과) ;
  • 이형환 (건국대학교 생물학과)
  • Published : 1988.04.01

Abstract

Immunological analysis between endotoxin proteins produced by Bacillus thuringiensis serovar. kurstaki HD1 and HD73 have been investigated by using polyclonal antibodies. The antisera against the endotoxin proteins were prepared from rabbits injected with the endotoxin protein antigens. When about 2mg/$m\ell$ of the antigens were injected for 7 times, the titers were highest. The stability of the antigens was reduced to about 50% after 9 days incubation at 4$^{\circ}C$. The sensitibity of endotoxin protein from B. thuringiensis HD1 and HD73 by indirect ELISA was 50ng/$m\ell$ and 400ng/$m\ell$, respectively. The cross reaction of antiserum appeared that anti-HD1 partialy reacted with crystal protein but anti-HD73 reacted with HD1 endotoxin about 100%.

곤충치사 독소를 생성하는 Bacillus thuringiensis serovar. kurstaki HD1과 HD73 균주에 대한 내독소 단백질의 특성을 규명하기 위하여 독소단백질의 항체 생산성, 항원 안정성, 정량 및 교차반응실험을 수행하였다. 곤충치사 내독소 단백질에 대한 항체는 토끼 마리당 약 2mg의 내독소 항원을 4회 주사했을 때 급격히 증가하여 6~7회 투여시에 최대치의 항체가 생성되었다. 내독소의 항원 안정성을 ELISA로 조사했을 때 5일 이내는 안정하였으나 9일 이후는 급격히 감소하였다. 간접 ELISA에 의한 B. t. k. HD1과 HD73 내독소의 정량 감도는 각각 50$\mu\textrm{g}$/$m\ell$, 400ng/$m\ell$이었다. HD1과 HD73 균주의 내독소 단백질에 대한 항혈청은 B. t. serovar israelensis 와 침강반응이 일어나지 않았다. B. t. k. 균주의 동일 아종간 내독소 단백질에 대한 항체의 교차반응에서 HD1 내독소 항체는 HD73 균주의 내독소 항원과 부분적으로 반응하였으나 HD73 내독소 항체는 HD1 항원과 100% 반응하였다.

Keywords