Differentitation of Yeast Species by Techniques of Electrophoresis and Immunodiffusion

단백질의 전기영동 패턴 및 항체 특성을 이용한 효모의 동정

Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and immunodiffusion method were used for the species differentiation of yeasts, Saccharomyces cerevisiae, Candida utils, Candida tropicalis, and Kleuyveromyces fragilis. Comparing the electrophoretic patterns of soluble and membrane proteins, Saccharomyces cereνisiae was similar to Candida utilis but was different from Candida tropicalis and Kleuyveromyces fragilis. In immunochemical properties of soluble proteins, Saccharomyces cerevisiae was almost identical with Candido utilis. However, Saccharomyces cerevisiae or Candida utilis was quite different from Candida tropicalis and Kleuyveromyces fragilis in their immunoreactivities. In immunochemical properties of membrane proteins, almost the same results were obtained irrespective of four yeast species. By using SDS-PAGE and immunodiffusion methods, Saccharomyces cerevisiae and Candida utilis were difficult to differentiate but both species were easily differentiated from Candida tropicalis and Kleuyveromyces fragilis.

본 연구는 효모를 동정하는 방법으로서 각 효모의 단백질 조성 차이와 이들 단백질의 면역학적 특성에 의한 새로운 동정법을 개발하고자 하였다. S. cerevisiae, C. utilis, C. tropicalis, K. fragilis 의 4가지 효모를 배양하여 세포를 파괴시킨 다음 가용성 단백질과 막 단백질을 분리 추출하였다. 4종 효모의 가용성 단백질과 막 단백질의 조성은 SDS-polyacrylamide gel electrophoresis를 실시 비교하였다. S. cerevisiae와 C. utilis 는 전기영동 pattern상 유사하였고 이들은 쉽게 C. tropicalis, K. fragilis 로부터 구별이 가능하였다. 또한 4종 효모의 가용성 단백질과 막 단백질을 토끼에게 주사하여 각각에 대응하는 항체를 만든 후 Ouchterlony double immunodiffusion을 실시하여 형성된 precipitin line에 의한 효모의 동정을 수행하였다. 면역학적으로도 S. cerevisiae와 C. utillis의 유사성이 증명되었고 이들은 C. tropicalis, K. fragilis 와 상이함이 관찰되었다.