Detection of Antigen-Specific Lymphocytes in Bacillus Calmette Guerin-Infected Mice by a Direct Rosette Assay

  • Lee, Hern-Ku (Department of Microbiology and Immunology, Chonbuk National University Medical School) ;
  • Kim, Chong-Shick (Department of Microbiology and Immunology, Chonbuk National University Medical School) ;
  • Ha, Tai-You (Department of Microbiology and Immunology, Chonbuk National University Medical School)
  • 발행 : 1987.06.30

초록

BCG 감염마우스의 비장으로부터 BCG 항원에 대한 수용체를 가진 세포를 BCG 항원으로 감작시킨 면양 적혈구(SRBC)를 이용한 rosette 방법으로 분리하였다. SRBC에 흡착되는 적정 BCG 항원 농도를 알아보기 위하여 tannic acid(1:20,000)으로 전처리한 SRBC에 여러 농도의 BCG 항원으로 작용시킨 결과 $50\;{\mu}g/ml$의 BCG 항원으로 반응시킨 경우 가장 높은 rosette 형성을 관찰할 수 있었다. 비장세포와 항원처리 SRBC와의 작용시간에 따른 rosette 형성율은 1시간 후에 최고에 달하였고 시간의 경과한다 하여 증가하지 않았다. BCG 감염후 1주에서 8주까지 비장에서의 rosette 형성세포를 관찰한 결과 감염 $3{\sim}4$주 후부터 가장 높은 rosette 형성율을 보였으며 이때 rosette 형성세포는 전 비장세포중 $5{\sim}7%$를 차지하였다.

A new method for rosette assay is described for the detection of antigen-specific lymphocytes from BCG-infected mice using sheep erythrocytes coated with BCG antigen. The optimal concentration of BCG antigen for preparation of indicator cells and the incubation time of antigen coated erythrocytes-lymphocytes mixture were $50\;{\mu}g/ml$ and 1 h, respectively. The number of rosette-forming cells (RFC) during the course of BCG infection showed gradual increase as infection progressed and RFC was reached maximum (about 5-7% of splenic lymphocytes formed rosette) at 3 or 4 weeks after infection.

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