The Journal of the Korean Society for Microbiology (대한미생물학회지)

The Korea Society for Microbiology (대한미생물학회)
권호 표지

Detection of Antigen-Specific Lymphocytes in Bacillus Calmette Guerin-Infected Mice by a Direct Rosette Assay

  • Lee, Hern-Ku (Department of Microbiology and Immunology, Chonbuk National University Medical School) ;
  • Kim, Chong-Shick (Department of Microbiology and Immunology, Chonbuk National University Medical School) ;
  • Ha, Tai-You (Department of Microbiology and Immunology, Chonbuk National University Medical School)
  • Published : 1987.06.30
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Abstract

A new method for rosette assay is described for the detection of antigen-specific lymphocytes from BCG-infected mice using sheep erythrocytes coated with BCG antigen. The optimal concentration of BCG antigen for preparation of indicator cells and the incubation time of antigen coated erythrocytes-lymphocytes mixture were $50\;{\mu}g/ml$ and 1 h, respectively. The number of rosette-forming cells (RFC) during the course of BCG infection showed gradual increase as infection progressed and RFC was reached maximum (about 5-7% of splenic lymphocytes formed rosette) at 3 or 4 weeks after infection.

BCG 감염마우스의 비장으로부터 BCG 항원에 대한 수용체를 가진 세포를 BCG 항원으로 감작시킨 면양 적혈구(SRBC)를 이용한 rosette 방법으로 분리하였다. SRBC에 흡착되는 적정 BCG 항원 농도를 알아보기 위하여 tannic acid(1:20,000)으로 전처리한 SRBC에 여러 농도의 BCG 항원으로 작용시킨 결과 $50\;{\mu}g/ml$의 BCG 항원으로 반응시킨 경우 가장 높은 rosette 형성을 관찰할 수 있었다. 비장세포와 항원처리 SRBC와의 작용시간에 따른 rosette 형성율은 1시간 후에 최고에 달하였고 시간의 경과한다 하여 증가하지 않았다. BCG 감염후 1주에서 8주까지 비장에서의 rosette 형성세포를 관찰한 결과 감염 $3{\sim}4$주 후부터 가장 높은 rosette 형성율을 보였으며 이때 rosette 형성세포는 전 비장세포중 $5{\sim}7%$를 차지하였다.

Keywords