Characteristics of the R plasmid pKU10 isolated from Pseudomonas putida

Pseudomonas putida에서 분리한 플라스미드 pKU 10의 특성

The characteristics of the plasmid pKU10 isolated from Pseudomonas putida KU816 were investigated and its restriction map was constructed. The pKU10 plasmid was a small R plasmid carrying genes for resistance to ampicillin, tetracyclin, and chloramphenicol, and cured by treatment with mitomycin C. The molecular size of pKU10 was estimated to be 9.4Kb. Pseudomonas strains and E. coli cells could be transformed for antibiotic resistance characters specified by pKU10 plasmid DNA. By incompatibility test with other plasmids, pKU10 is grouped into IncP-1. EcoRI, XhoI, SalI, BglII, and SmaI cleaved pKU10 once, while PstI cleaved at two sites, and HindIII cleaved at six sites. The restriction map was constructed by partial and complete digestion of the purified plasmid DNA with single, double, or triple restriction enzymes. Thus, pKU10 is expected to be used for a cloning vector in Pseudomonas cells.

Pseudomonas putida KU816에서 분리한 플라스미드 pKU10의 여러가지 특성을 조사하고 그 제한 효소 지도를 작성하였다. pKU 10은 암펴설런, 테트라사이클린, 클로람페니콜에 대한 내성 유전자를 갖는 작은 R factor로서 마이토마이신 C에 의하여 큐어링 된다. 플라스미드의 크기는 9.4Kb로 측정되었다. pKU 10은 Pseudomonas와 E.coli블 숙주로 하였을 때 안정하게 형질 발현이 되다. 또한 pKU 10의 불화합성균은 IncP-I으로 조사되었다. Eco RI, Xho I. SaiI, BglII, SmaI은 pKU 10 DNA를 한 부위에서 자르고, Pst I은 두 부위, Hind Ill는 여섯 부위에서 자른다. 제한 효소 지도는 제한 효소를 이중, 삼중으로 완전 소화시키거나, 부분 소화시켜서 얻었다. pKU 10은 Pseudomonas속에서 유용한 클로닝 벡터호 이용된 것으로 기대된다.