Abstract
S. diastaticus hydrolysised $\alpha$-1.4 linkage of the starch and was known fermenting yeast strain, but poorly hydrolized $\alpha$-1.6 linkage of the starch. To improve the starch fermentation ability of yeast, we tried that protoplast fusion between S. diastaticus and C. tropicalis and finally two starins of fusant (FPDC42, FPDC43) were obtained. C. tropicalis well hydrolysis both $\alpha$-1.4 and $\alpha$-1.6 linkanges in the starch. The protoplast of parental auxotrophic cells were fused in the presence of 10mM CaCl$_2$ and 35% of polyethylene glycol (M. W. 4,000). The fusion frequency was 10$^{-5}$ to 10$^{-6}$. Properties of the fusants(genetic stability, assimilation of carbon sources, random spore formation, copper resistance, NaCl tolerance, DNA content, cell size and growth rate) were investigated.
본 실험의 목적은 starch의 alcohol발효에 있어서 전분의 $\alpha$-1.4 linkage을 분해하여 alcohol발효를 하는 S diastaticus와 전분 중의 $\alpha$-1.4, $\alpha$-1.6 linkage를 모두 분해할 수 있는 C. tropicalis 간의 이속간의 protoplast fusion을 시켰다. 이때 세포 융합의 빈도는 $10^{-5}$-$10^{-6}$이였으며, 이틀 융합체중 amylase 생성능과 유전적으로 안정한 융합체를 분리하였다. fusant의 성질을 조사하기 위하여 탄소원 자화능을 조사한바 parent와 달리 탄소원 자화능이 일부 보완됨을 보였고 또한 fusant는 원 parent보다 세포의 크기가 클 뿐만아니라, DNA함량도 많았다. spore형성능은 S. diastaticus A4는 spore를 형성하나 C. tropicalis는 형성할 수 없는 반면에 fusant는 형성하였고, Cu$^{++}$ 내성과 NaCl 내염성도 조사하였는데 fusant는 parent의 중간 성질을 가졌다. Fusant의 증식율을 조사하기 위하여 생육도를 조사한 결과 Parent보다 유도기가 길었음을 알았다.