Microbiology and Biotechnology Letters (한국미생물·생명공학회지)

The Korean Society for Microbiology and Biotechnology (한국미생물·생명공학회)
권호 표지

Conditions for Intergeneric Protoplast Fusion of Yeast

효모의 이속간 원형질체 융합조건

  • Kim, Young-Ho (Department of Microbiology, Kyungpook National University) ;
  • Seu, Jung-Hwn (Department of Microbiology, Kyungpook National University)
  • Published : 1985.12.01
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Abstract

Optimum conditions of PEG treatment for the intergeneric fusion of yeast protoplasts were investigated. Fusants were selected by nutritional complementation on minimal medium. The intergeneric fusion frequency between pro-toplasts of S. cerevisiae and C. tropicalis was distributed 10$^{-4}$ to 10$^{-6}$, depending on the combination of parental strains. PEG 4000 or 6000 are equally effective. 30%(w/v) PEG 4000 was found to be optimum and below 20% its stabilizing effect was lost, resulting in protoplast lysis, and optimum pH was 8.0. The efficiency of PEG was enhanced by higher temperature of the PEG solution, and by the addition of Ca ions. The stimulating effect of Ca ions in the range of 1 mM to 100 mM proved similar.

전분을 발효할 수 있는 새로울 효모균수의 개발을 목적으로 PEG를 fusogen으로 사용하여 이속 효모간 원형질체 융합을 시도하였다. 원형질체 융합에 사용한 친균주의 genetic marker로는 상보적 영양요구성을 이용하였고 각각의 영양요구성이 상호보완되어 최소배지상에 자라는 colony를 융합체로하였다. S. cerevisiae와 C. tropicalis의 이속간 원형질체의 융합빈도는 $10^{-4}$에서 $10^{-6}$ 정도였으며, 원형질체 융합에 있어서 PEG 4,000. 30%가 가장 좋은 효과를 나타내었다. 최적 pH는 8.0이었으며, PEG의 처리효과는 온도가 상승함에 따라 증가하여 35$^{\circ}C$에서 최적을 나타내었고 또한 Ca이온의 첨가에 의해서도 증가하였는데 Ca 이온의 촉진효과는 1mM과 100mM 농도 사이에서 최고를 나타내었다.

Keywords