Abstract
To investigate the condition for the protoplast fusion of Streptococcus lactis, streptomycin(200 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$) resistant and rifampicin (200$\mu\textrm{g}$/$m\ell$) resistant mutants were isolated. By using these markers, protoplast fusion was carried out in the presence of CaCl$_2$ and polyethylene glycol. The optimal conditions for the protoplast fusion were obtained by treatment of protoplasts with 150 mM CaCl$_2$ (final concentration; 25 mM) and 40％ (w/v) PEG 4, 000 for 2 min. At the optimal conditions, the fusion frequency was 6.26$\times$10$^{-5}$ . On the other hand, genetic recombination between the antibiotic resistant mutants by mating was not observed.
유전물질이 쉽게 교환될 수 없는 세균의 유전학적 연구와 새로운 균주개발에 유용한 protoplast 융합을 Streptococcus lactis에 적용하기 위하여 UV를 사용하여 streptomycin (200$\mu\textrm{g}$/$m\ell$)과 refampicin(200 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$)에 각각 내성을 나타내는 변이주를 분리하였으며 이 변이주들을 사용하여 Protoplast 융합의 영향인자를 검토하였다. 두 약제내성 변이주의 Protoplast를 1:1의 비율로 혼합하고 CaCl$_2$와 polyethylene glycol(PEG)로 처리하여 융합세포를 얻을 수 있었으며, 이 때 CaCl$_2$의 최적 처리농도는 150nM (최종농도 : 25mM)이었 고 40% (w/v)의 PEG 4,000으로 2분간 처리하는 것이 가장 좋았다. 융합빈도는 최대 6.26$\times$$10^{-5}$이었다. Mating에 의한 약제내성 유전자의 재조합 현상은 일어나지 않았다.
