Combination of Colony Formation and Congo Red Reaction for Detecting Intra- and Extra-Cellular Cellulolytic Activities

세포내외 섬유소 분해능 검출을 위한 Colony 형성과 Congo Red반응의 병용

A selective medium which allows growth of only cellulolytic bacteria was developed. The medium composed of 0.5% carboxymethylcellulose (CMC), 0.005% yeast extract, minerals and agar. Colony formation on this medium indicates overall activities of cellulose utilization. A subsequent test with Congo Red dye could distinguish extracellular cellulolysis from intracellular type.

섬유소 분해능이 있는 bacteria를 분리 동정하거나 유전자 재조합에 의한 형질 전환주중에서 이 분해능을 갖는 재조합주를 신속하고도 착실하게 분리해내는 일은, 섬유소 분해능을 가진 유전자를 복제 및 발현시키려는데 있어서 일차적인 조건이 된다. 한정된 양(0.005%)의 yeast ext를 함유한 기본배지에 0.5%의 CMC를 첨가 시킴으로써, 오직 섬유소 분해능이 있는 bacteria만을 분리할 수 있었고, 뒤이은 Congo red dye처리에 의해 세포벽 밖으로 분비 가능한 섬유소 분해효소를 생산하는 bacteria를 다시 구별해낼 수 있었다. 한편, 개발된 CMC 기본배지는 CMC대신 다른 탄소원 중합체를 대치시킴으로써, 다른 종류의 탄수화물 분해능을 갖는 bacteria도 쉽게 분리해 낼 수 있음을 알 수 있었다.