Abstract
For the utilization as donor cells of conjugation, DAP-Auxotrophs were isolated from C. coli cells, carrying plasmid $p^{RD1}$ with(a) drug resistance makers from Pseudononas $(Km^r, \;Carb^r, \;Tc^r)$ and (b) the nif-gene group from Klebsiela. E. coli $p^{RD1}$ cells were treated with nitrosoguanidine for the mutagenesis and cephalexin for the isolation of DAP-Auxotrophs. The nature of auxotrophs was verified by suitable biochemical test and checking with 6-cyanopurine as a color indicator for the presence of nif-gene.
E. coli $P^{RDI}$에서 DAP-영양요구성 변이주를 분리하였으며 이 변이주가 갖고 있는 plasmid의 안정성과 활성도를 확인하는 살험을 통하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Mutagen인 NG를 처리 후 DAP-변이주를 보다 쉽게 분리하기 위하여 항생제처리를 하였다. 이때 사용균주가 갖고 있는 plasmid내의 내성인자들 중에 carbr인자로 인하여 같은 계열에 있는 penicillin유도체들에 대해서는 교차내성을 갖고 있음이 확인되었다. 그러냐 penicillin과 같은 기능을 갖고 있으나 그 구조가 다른 cephalexin, cycloserine에 대해서는 교차 내성을 잘 나타내지 않았으므로 항생제처리로서는 cephalexin을 사용하였다. 2. 세균 접합을 통하여 DAP-균주의 특성을 동정하였다. 즉 nif-gene의 안정성과 활성도는 DAP-균주로 부터 plasmid를 전이반은 전이체에서 6-cyanopurine첨가로 확인하였다.