Growth Patterns of Temperature-sensitive Mutants of Bacillus Thuringiensis

Bacillus thuringiensis 의 Temperature-sensitive Mutants 분리와 특성 연구

  • Lee, Hyung-Hoan (Molecular Microbiology Laboratory Department of Biology, Kon Kuk University) ;
  • Lee, Hoon-Ku (Molecular Microbiology Laboratory Department of Biology, Kon Kuk University)
  • Published : 1983.09.01

Abstract

Bacillus thuringiensis was mutagenized with UV light irradiation and nitrosoguanidine. Twenty-four tem perature-sensitive ts mutants were isolated at 42$^{\circ}C$ and classified into two groups by growth on nutrient agar at 42$^{\circ}C$. First is the lethal group, which did not grow at the nonpermissive temperature, the second is the reduced group whose growth was restricted from one-half to one-fourth, Thirteen ts mutants belong to the lethal group and eleven ts mutants belong to the reduced group. Auxotrophic mutant, A-N28 required five amino acids as growth factors, A-N65 also five amino acids, A-N92 seven, A-N115 four and A-N156 three. Bacillus thuringiensis wild type is resistant to penicillin, ampicillin, and cephalothin. The ts-Ul7l, A-N92 and A-Nl15 are sensitive to the three antibiotics. The ts -U601, -U603, -U604 and -Ul71 did not grow at the permissive temperature after temperature-shifting from 42$^{\circ}C$. Four auxotrophic mutants (A-N38, A-N65, A-N92 and A-Nl15) did not form spores in their cells.

Bacillus thuringiensis 3ab K- 3 균주를 28$^{\circ}C$에서 UV광으로 돌연변이를 유도한 다음에 42$^{\circ}C$에서 24개의 Temperature-sensitive(ts)돌연변이 균주를 분리하여 42$^{\circ}C$에서의 성장과 항생제 저항성에 대한 성격을 연구하였다. 24개의 ts 돌연변이 균주중에 13개의 ts돌연변이체는 42$^{\circ}C$의 제한온도에서 전혀 성장을 하지 않았으며, 나머지 11개의 돌연변이체는 성장이 28$^{\circ}C$에서 보다 1/2 에서 1/4까지 감축되었다. 이러한 성격에 따라서 ts돌연변이체는 치사군과 비 치사군으로 나눌수 있었다. 또한 B. thuringiensis SI K-2을 nitrosoguanidine으로 28$^{\circ}C$에서 처리하여 7개의 Auxotrophic mutant을 분리하였다. A-N28은 Arg$^{-}$ . Gly$^{-}$ , Leu$^{-}$ , Met$^{-}$ , Ser$^{-}$ , Val$^{-}$ 을 요구했고, A-N 65는 Ala $^{-}$ , Gly$^{-}$ , Leu$^{-}$ , Met$^{-}$ , Ser$^{-}$ , Val$^{-}$ 을 요구했으며 A-N 92는 Gly$^{-}$ , Leu$^{-}$ , Met$^{-}$ 을, A-N115는 7개의 아미노산을 A-N156은 8개를 요구했다. B. thuringiensis 3ab K-3와 SI K-2 는 Penicillin, Ampicillin과 Cephalothin에 저항성을 나타냈고 ts-U171, A-N92와 A-N115는 이 세항생제에 민감성을 나타냈다. Temperature - sensitive돌연변이균주를 42$^{\circ}C$에서 24시간 배양후에 28$^{\circ}C$로 옮기어 배양한 결과 ts-U601, -U603, -U604와 -U171은 성장을 더 이상하지 않았다.

Keywords