Cellulase 성분 중 Endo-gluanasec의 반응 및 흡착특성에 관한 연구

Reaction Kinetics and Absorption Property of Low Molecular Weight Endo-glucanase Component of Cellulase

저분자량의 효소인 셀루라아제가 Sephadex G-100 gel chromatography를 사용하여 정제되었다. 정제된 성분의 생화학적 성질들이 조사되었는데 최적 PH와 온도가 각각 6.0과 5$0^{\circ}C$이었다. 서로 다른 결정도(crystallinity)를 갖고 있는 4가지 섬유소 기질의, 효소에 의한 가수분해가 측정되었다. 무정형(amorphous) 부분의 가수분해가 일어난 후에 결정화되어 있는 부분의 가수분해가 뒤따라온다는 것을 알 수 있었다. 효소가 섬유소 기질에 흡착되는 정도가 가수분해 반응에 미치는 영향을 보기 위해 흡착에 대한 연구가 수행되었다. 시간에 따라서 소분자량의 endo-glucanase가 여러가지섬유소 기질에 흡착되는 정도의 변화가 25분간 측정되었다. 무정형의 섬유소에 흡착되는 속도와 정도가 결정형 섬유소에 대한 그것들 보다 더욱 크게 나타났다. 이러한 결과는 endo-glucanase가 섬유소의 결정화 부분의 가수분해보다는 무정형부분의 가수분해에 대해서 더욱 중요한 역할을 한다는 것을 시사해 준다.

Low molecular weight endo-glucanase was partially purified from cellulase complex using Sephadex G-100 gel chromatography. Biochemical properties of the purified component was investigated. Optimum pH and temperature determined were 6.0 and 5$0^{\circ}C$, respectively. Enzymatic hydrolysis of four cellulosic substrates having varying crystallinity was evaluated. It was found that hydrolysis of amorphous region was followed by the hydrolysis of crystalline region. In order to examine the effect of adsorption of the enzyme onto the cellulosic substrates on the hydrolysis kinetics, adsorption studies were carried out. Time course of adsorption of low molecular weight endo-glucanase onto various cellulostances was observed for 25 min. The rate and amount of adsorption to amorphous cellulose was greater than those to the crystalline cellulose. This result suggested that the role of endo-glucanasc was more important to the hydrolysis of amorphous cellulose than to the crystalline region of the cellulose.