Prodution and Properties of the Insoluble Penicillinase from Streptomyces

방선균이 분비하는 불용성 Penicillinase

A Streptomyces sp. strain AS-727 which was capable of producing penicillinase, was isolated from soil. The enzyme production was affected by the carbon and nitrogen sources added. Among them so far tested, glucose (or maltose) and sodium nitrate increased the enzyme production. And the amount of enzyme prodced reached maximum in 4 days cultivation. The optimla pH and temperature of the penicillinase was between pH 6.0 to 8.0 and 4$0^{\circ}C$ respectively. The stabel pH range of the enzyme was stable at 4$0^{\circ}C$, but it lost about 30％ and 40％ of the the activity respectively when it was treated at 6$0^{\circ}C$ and 8$0^{\circ}C$ for 60 minutes. The activity of the enzyme was inhibited by Z $n^{++}$, but A $g^{+}$, $Co^{++}$, $_Mn^{++}$, $Ca^{++}$, P $b^{++}$ did not affected enzyme activity. Peculiarly, the enzyme protein precipitated by freezing or addition of ammonium sulfate, urea, sodium chloride and some organic solvents as etanol, methanol, acetone was not dissolved in deionized water or any buffer solution.n.n.ion.n.n.

특이하게도 일단 어떤 원인으로든지 변성이 일어나서 침전이 형성되고 난 후에는 그 변성으로 인하여 다시 용해되지 않는 penicillinase를 생성분비하는 Streptomyces 속 균주 AS-727을 토양으로부터 얻었으며, 이 균의 효소생산성과 이 효소의 일반적성질을 검토한 결과는 다음과 같다. 1) 본 효소의 생산을 위해서는 질소원으로서 sodium nitrate, 탄소원으로서 glucose 나 maltose를 사용하여 4 일간 배양하는 것이 바람직했으며 2) 정제는ammonium sulfate로 완전포화시켜 생성된 침전을 원심분리로 모아 그것을 투석해서 조정제효소를 얻는데, 이때 투석할 때 침전은 용해 되지 않는다. 3) 본 효소의 최적 pH는 중성부근 (6.0~8.0)이며 최적온도는 4$0^{\circ}C$ 근처이고, 4) 안정 pH 범위는 4.0~9.0으로서 비교적 넓었으며 열에 대해서는 4$0^{\circ}C$에서는 안정했으며 6$0^{\circ}C$와 8$0^{\circ}C$에서 60 분간 처리하면 각각 약 30%와 40%가 실활되었다. 5) 본 효소의 활성에 있어서 zinc chloride가 $10^{-3}$ M 농도에서 약 20%, $10^{-2}$ M 이상의 고농도에서는 95% 이상을 조해하였다. 6) 그리고 동결이나 명종 고류 또는 유기용매로 일단 형성된 효소단백침전은 다시 용해되지 않는 특이한 성질을 가졌다.