Abstract
1. Isolation and identification of amylase-producing bacteria. The powerful strain A-12 and S-8 were respectively isolated from air and soil after screening a large number of amylase-producing bacteria. Their bacterial characteristics have been investigated and it has been found that all characteristics of strain A-12 and S-8 are similar to Bac. subtilis of Bergey's manual except for the acid formation from a few carbohydrates and the citrate utilization, i.e., the strain A-12 shows negative in the citrate utilization, and the acid formation from arabinose and xylose, S-8 shows negative in the acid formation from xylose. 2. Amylase production by Liquid cultures with solid materials. Several conditions for amylase production by strain A-12 in stationary cultures have been studied. The results obtained are as follows. (1) The optimum conditions are:temperature $35^{\circ}C$, initial pH 6.5 to 7.0 and incubation time 3 to 4 days. (2) The amylase production is not affected by the preservation period of the stock cultures. (3) Among the various solid material, the defatted soy bean is found to be the best for t1e amylase production. However, the alkali treatment of the defatted soy bean gives no effect contrary to the cage of defatted rape seed. The addition of soluble starch to the alkali extract of defatted soy bean shows the increased amylase production. (4) Up to 1% addition of ethanol to carbon dificient media gives the improved amylase production, whereas the above effect is not found in the case of carbon rich media. (5) The amylase production can be increased 2.5 times when 10% of defatted soy bean is admixed to cheaply available wheat bran. (6) The excellent effect is found for amylase production when 20% of wheat bran is admixed to defatted dry milk which is a poor medium. The activity is found to be $D^{40^{\circ}}_{30'}$ 7,000(L.S.V. 1,800) in 10% medium. (7) No significant effect is observed due to the addition of various inorganic salts. 3. Amylase production by solid cultures. Several conditions for amylase production by strain A-12 in wheat bran cultures have been studied and the results obtained are as follows. (1) The optimum conditions: are temperature $33^{\circ}C$, incubation lime 2 days, water content added 150 to 175% and the thickness of the medium 1.5cm, The activity is found to be $D^{40^{\circ}}_{30'}$ 36,000(L.S.V. 15,000) (2) No significant effect is found in the case of the additions of various organic and inorganic substances.
1. Amylase 생산세균(生産細菌)의 분리(分離) 및 동정(同定) 다수(多數)의 amylase 생산세균(生産細菌)을 검색(檢索)하여 공기(空氣) 및 토양(士壞)에서 강력균주(强力菌株) A-12 및 S-8를 얻었다. 이들 균(菌)의 균학적(菌學的) 성질(性質)을 검토(檢討)한 결과(結果) 균주(菌株) A-12 및 S-8의 모든 특성(特性)은 Bergey's manual의 Bac. subtilis와 비슷하나 몇가지 탄수화물(炭水化物)로부터의 산생성(酸生成)과 구연산 이용성(利用性)이 달랐다. 즉(卽) A-12는 구연산을 이용(利用)하지 않고 arabinose와 xylose에서 산(酸)을 생성(生成)하지 않았으며 S-8는 xylose에서 산(酸)을 생성(生成)하지 않았다. 2. 액체배양(液體培養)에 의(依)한 Amylase 생산(生産) 정치배양(靜置培養)에 있어서 균주(菌株) A-12의 amylase 생산(生産)에 관(關)한 제반조건(諸般條件)을 검토(檢討)한 결과(結果)는 다음과 같다. (1) 최적조건(最適條件)은 배양온도(培養溫度) $35^{\circ}C$, 초발(初發) PH $6.5{\sim}7.0$, 배양기간(培養期間) $3{\sim}4$일(日)의 조건(條件)이었다. (2) 전배양(前培養)한 균(菌)의 보존기간(保存期間)는 amylase 생성(生成)에 영향(影響)을 주지 않았다. (3) amylase 생산(生産)에 있어서 각종(各種)의 고형원료중(固形原料中) 탈지대두박(脫脂大豆粕)이 가장 좋았다. 그러나 탈지대두박(脫脂大豆粕)을 alkali 처리(處理)한 것은 유채박(油菜粕)의 경우와는 반대(反對)로 그대로 사용(使用)하는 것보다 효과(效果)가 적었다. 대두박(大豆粕) alkali 침출액(浸出液)에 가용성(可溶性) 전분(澱粉)을 첨가(添加)한 배지(培地)는 amylase 생성(生成)을 뚜렷이 증가(增加)시켰다. (4) 탄소원(炭素源)이 부족(不足)한 배지(培地)에서는 1%의 ethanol의 첨가(添加)는 amylase 생성(生成)을 증가(增加)시켰으나 탄소원(炭素源)이 풍부(豊富)한 배지(培地)에서는 효과(效果)가 없었다. (5) 저렴(低廉)하게 구(求)할 수 있는 밀기울에 10%의 탈지대두박(脫脂大豆粕)을 혼합(混合)할 때에는 amylase 생성(生成)이 밀기울만의 경우의 2.5배(倍)로 증가(增加)되었다. (6) 탈지분유(脫脂粉乳)의 단용배지(單用培地)에서는 amylase 생성(生成)이 극(極)히 불량(不良)하였으나 탈지분유(脫脂粉乳)에 20%의 밀기울을 혼합(混合) 할때에는 amylase 생산(生産)이 월등(越等)히 증대(增大)되었다. 그 역가(力價)는 10% 농도배지(濃度培地)에서 $D^{40^{\circ}}_{30'}$ 7,000(L.S.V. 1,800)이었다. (7) 각종(各種) 무기염류(無機鹽類)의 첨가효과(添加效果)는 인정(認定)되지 않았다. 3. 밀기울 고체배양(固體培養)에 있어서 균주(菌株) A-12의 amylase 생산(生産)에 관(關)한 제반조건(諸般條件)을 검토(檢討)한 결과(結果)는 다음과 같다. (1) 최적배양조건(最適培養條件)은 배양온도(培養溫度) $33^{\circ}C$, 기간(其間) 2일간(日間) 첨수량(添水量) $150{\sim}175%$, 배지(培地)의 두께 1.5cm의 조건(條件)이었다. 최적조건(最適條件)에서의 amylase 역가(力價)는 $D^{40^{\circ}}_{30'}$ 36,000 (L.S.V. 15,000)이었다. (2) 각종(各種) 유기자원(有機資源) 및 무기물질(無機物質)의 첨가효과(添加?果)는 인정(認定)되지 않았다.